產品名稱:NEB rCutSmart緩沖液(B6004V)現(xiàn)貨供應
產品貨號:B6004V
產品品牌:NEB
產品簡介:
NEB rCutSmart緩沖液(B6004V)適用于各類限制性內切酶,,超過 210 種限制性內切酶都能在rCutSmart緩沖液中表現(xiàn)出百分之bai的活性,從而極大地簡化了實驗過程中雙酶切反應的準備工作。rCutSmart 緩沖液中富含重組白蛋白,,因此可減少試管數(shù)量和移液操作步驟。此外,,許多DNA修飾酶也能在rCutSmart緩沖液中保持100% 活性,,因此無需進行后續(xù)純化。
此外,,New England Biolabs為每種限制性內切酶提供了一種采用顏色標記的10X NEBuffer 反應緩沖液,,以確保酶保持最佳(100%)活性。New England Biolabs的大多數(shù)酶均配有四種標準NEBuffer 緩沖液之一,。這些緩沖液中含有重組白蛋白,。
使用方法:
同時用兩種限制性核酸內切酶消化 DNA 底物(雙重消化)是一種常見的省時程序。選擇最hao的NEBuffer以提供優(yōu)化酶活性的反應條件,,并避免與某些酶相關的星形活性是一個重要的考慮因素,。每種酶都配有最佳的 NEBuffer,以確保 100% 的活性,。NEBuffer 組合物列在緩沖區(qū)頁面上,。
設置雙消化
· 可以在 rCutSmart 緩沖液™中設置含有 NEB 限制性內切酶的雙重酶解。否則,,請選擇對兩種酶都具有最大活性的 NEBuffer,。如果對星體活性有顧慮,請考慮使用我們的高保真 (HF®) 酶之一,。
· 根據(jù)推薦方案設置反應,。任何反應中甘油的最終濃度應小于5%,以盡量減少星活性的可能性,。例如,,在50μl反應中,加入的酶的總量不應超過5μl,。 NEBcloner也可用于確定推薦的雙消化條件,。
· 如果需要兩種不同的孵育溫度,,請選擇最佳反應緩沖液并相應地設置反應。加入第一種酶并在所需溫度下孵育,。然后,,加熱滅活第一種酶,加入第二種酶并在推薦溫度下孵育,。
· 根據(jù)酶在非最佳NEBuffer中的活性等級,,可以調整單位數(shù)或孵育時間,以補償較慢的裂解速率,。限制性內切酶性能圖表可指示星形活性是否是次優(yōu)緩沖液的問題,。
設置順序消化
· 如果沒有兩種酶表現(xiàn)出>50%活性的緩沖液,則可以進行順序消化,。
· 使用推薦緩沖液中鹽濃度zui低的限制性核酸內切酶設置反應并孵育完成,。
· 調整反應的鹽濃度(使用少量濃鹽溶液)以近似第二限制性核酸內切酶的反應條件。
· 加入第二種酶并孵育以完成第二反應,。
· 或者,,可以使用離心柱在第二次反應之前分離DNA。
產品選購:
貨號 | 產品名稱 | 規(guī)格 |
B6004V | rCutSmart緩沖液 | 2.5 ml |
天津益元利康生物科技有限公司,,提供NEB rCutSmart緩沖液(B6004V)現(xiàn)貨供應,,歡迎選購!
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