對于細胞破碎建議:
大小
當(dāng)濕法珠磨時細菌,,使用直徑為0.1毫米的玻璃珠,。
當(dāng)濕法珠磨時酵母/真菌,使用直徑為0.5毫米的玻璃珠或氧化鋯/二氧化硅珠,。
當(dāng)濕法珠磨時軟組織(如肝臟,、大腦,、肌肉),使用直徑為1.0毫米的玻璃珠或氧化鋯/二氧化硅珠,。當(dāng)濕磨組織時,,樣品量超過幾十毫克時,應(yīng)先預(yù)切碎成橫截面小于1毫米的碎片,,然后再進行研磨,。
濕磨時堅韌的組織(如結(jié)締組織、皮膚或“非木質(zhì)”植物材料),,首先預(yù)切碎或低溫粉碎,,并使用直徑為2.0毫米的氧化鋯珠。
使用時尤其是堅韌或纖維組織,,使用上面建議的相同尺寸的珠子,,但選擇更致密的珠子材料。例如,,使用氧化鋯-二氧化硅珠破碎孢子,,或使用三個2.3毫米的鉻鋼珠提取堅韌的纖維植物材料,如單子葉植物的葉子,。
一磅重的瓶子里有多少顆珠子,?
鉻鋼珠:
6.23毫米直徑~430
3.2毫米直徑~3300
2.3毫米直徑~7900
玻璃念珠:乘以3.2;氧化鋯-硅珠:乘以2.1,;氧化鋯珠:乘以1.4
密度
· 玻璃珠子的密度為2.5克/立方厘米,,是用于“打珠”的最常見的珠子介質(zhì)。
· 氧化鋯/氧化硅珠子的密度為3.7克/立方厘米(比玻璃密度高50%——對孢子和大多數(shù)組織都有好處),。
· 碳化硅尖銳顆粒(不是珠子)的密度為3.2克/立方厘米(由于顆粒具有鋒利的切割邊緣,,因此在堅韌的組織樣本上可能會工作得更快。它們優(yōu)于較便宜的氧化鋯/二氧化硅珠的優(yōu)勢正在研究中,。但請參見以下布雷因的評論,。
· 石榴石(一種鐵鋁硅酸鹽,尖銳的顆粒)的密度為4.1克/立方厘米,。像致密,、邊緣鋒利的SiC顆粒一樣,它可以加速堅韌組織的溶解,。與SiC尖銳顆粒不同,,石榴石顆粒在攪拌過程中會碎裂。當(dāng)對軟組織或含有細菌的糞便和土壤樣品進行均質(zhì)化時,,這種特性會很有用,。不需要混合珠子大小。從半充滿2毫米石榴石顆粒的微孔開始,,樣品迅速分散,。與此同時,,打珠產(chǎn)生了,原地,,小得多的石榴石碎片可以有效地破壞微生物,。
· 氧化鋯密度為5.5克/立方厘米(比玻璃密度高100%)-這種用于堅韌組織的陶瓷珠具有化學(xué)惰性,不易破碎,。
· 鉻鋼和不銹鋼密度為7.9克/立方厘米,。這些重珠子通常用于干磨葉子和種子。根據(jù)珠子的大小,,放置1到5個特殊的鋼珠增強型2毫升聚丙烯微孔管或者2毫升不銹鋼微型量具,。當(dāng)與鋼珠一起使用時,普通的螺旋蓋聚丙烯微閥可能會破裂或泄漏,。鉻鋼珠通常是不銹鋼珠的良好替代品,。雖然不銹鋼珠因其耐腐蝕性而經(jīng)常被選用,但鉻鋼珠并不昂貴...事實上,,它們足夠便宜,,可以用作“一次性用品”,從而消除了清潔和交叉污染的擔(dān)憂,。一個警告是:最終,,鉻鋼珠與水介質(zhì)接觸會生銹。應(yīng)立即將它們從細胞裂解物中去除,。訂購鉻鋼珠時,BioSpec提供了一個小磁鐵,,使這項工作變得輕松,。
· 碳化鎢密度為14.9克/立方厘米。雖然密度很高,,但這種珠子通常不用于生物制備,,因為它會使勻漿看起來“臟”。高重力離心將澄清勻漿,,但這很耗時,。上面列出的其他高密度介質(zhì)通常也能做得很好。
珠子的其他用途
· 酵母和細菌的快速簡便接種.在固體營養(yǎng)培養(yǎng)基中加入十幾個直徑為6.3毫米的無菌玻璃珠。使用側(cè)向運動搖動平板(或一疊平板),使添加的酵母和細菌懸浮液均勻分布在平板表面,。在接種體滲透到培養(yǎng)基凝膠中后,,可以通過翻轉(zhuǎn)平板并將珠子從蓋子中倒出來倒出珠子。
· 增加組織培養(yǎng)生長的表面積用直徑為6.3毫米的玻璃珠包裝滾筒瓶,、試管或小瓶。在這種應(yīng)用中,珠粒應(yīng)緊密包裝,,以防止珠粒在滾動或搖動過程中移動,。類似地,當(dāng)細胞在不激動的培養(yǎng)瓶中,,通過添加一層直徑為0.1 mm的珠子,,可以更快地達到匯合,并提高細胞密度,。
· 創(chuàng)造一個生物反應(yīng)器 通過用玻璃珠填充柱并接種選擇的表面粘附微生物或細胞,。
· 保持透析管垂直 在透析過程中通過在密封前加入一些大玻璃珠或大理石。
· 納米技術(shù),。將堅硬或易碎的顆粒研磨至亞微米尺寸,。一篇簡短的評論“高科技球磨機推動納米技術(shù)的進步”包含了使用Retsch對納米顆粒進行珠磨研磨的實用信息E-max™珠磨機MiniBeadbeater系列珠磨機將這種應(yīng)用擴展到處理少量(《0.5克)貴重材料。
· 用于智能手機顯微鏡附件的鏡頭,??梢?/span>
· 更換水在商業(yè)實驗室浴池中鋁珠. 無需擦拭濕試管,無需試管翻倒,,無需支架,、浮子或砝碼。BioSpec產(chǎn)品的“微小淚珠”鋁珠可為試管提供熱傳遞性能,。
· 來源于與基質(zhì)消化酶一起孵育的動物組織的活單細胞產(chǎn)量提高.探索塑料微珠的新應(yīng)用,。替換繁瑣的“手工研磨組織碎片通過用適當(dāng)?shù)拿赶M織的細胞外基質(zhì)而被溶解。
· Faster QuEchERS technique:使這一廣受歡迎的方案更快地從植物,、動物組織和食品中提取和分析小有機物(殺蟲劑,、除草劑、藥物),。通過在提取管中加入一些直徑為2 -3 mm的玻璃珠并渦旋,,將樣品水合和均質(zhì)化的時間縮短一半?;蛘?,更好的方法是通過在迷你攪拌器中均質(zhì)化多個提取管來提高通量。
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