IMDM培養(yǎng)基在DMEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加了硒,、HEPES、丙酮酸鈉以及額外的氨基酸和維生素,,并用硝酸鉀代替了硝酸鐵,,營(yíng)養(yǎng)非常豐富,,非常適合于快速增殖,高密度細(xì)胞培養(yǎng),。IMDM培養(yǎng)基不僅可以培養(yǎng)有特殊營(yíng)養(yǎng)要求的細(xì)胞,,還可以作為一些特別的無(wú)血清培養(yǎng)基的基礎(chǔ)液。IMDM培養(yǎng)基的使用方法:
1、準(zhǔn)確稱量試劑:根據(jù)不同的菌類和用途,,選擇適宜的培養(yǎng)基,,培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。
2,、校正pH值:將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi),,標(biāo)記劃線,加熱溶解,,補(bǔ)充水分,,測(cè)定酸堿度,常用pH6.8~8.0的精密試紙或酸度計(jì)測(cè)定,。用1NNaOH和1NHCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi),。
3、過濾:將玻璃漏斗置鐵架上,,再用IMDM(含雙抗)紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,,將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明。
4,、分裝:將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶?jī)?nèi),,塞好棉塞用牛皮紙包扎好,準(zhǔn)備滅菌,。
5,、滅菌:培養(yǎng)基的滅菌,常用高壓蒸汽滅菌法,。一般微生物的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死,,但細(xì)菌的芽胞有較強(qiáng)的抗熱性,須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達(dá)到*底滅菌的目的,。
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