細(xì)胞接種鋪板作為體外藥理實(shí)驗(yàn)中最基本的技能,，是實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵因素,。鋪板不勻又是科研實(shí)驗(yàn)中通往成功道路的一大障礙,，細(xì)胞聚集導(dǎo)致的接觸抑制現(xiàn)象使實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的可信度大打折扣,。本片文章將會(huì)介紹細(xì)胞鋪板不勻的解決方法有哪些,？一起來(lái)跟小編漲知識(shí)吧,！

對(duì)于96孔板,，每孔通常加入100μL細(xì)胞懸液。加樣方式為傾斜槍頭,，從孔的左邊靠近底部緩慢加入（加樣過(guò)快同樣容易導(dǎo)致細(xì)胞聚集）,。筆者建議，每加完半拉板子時(shí),，把細(xì)胞重新混勻,，繼續(xù)加樣。加樣結(jié)束后,，鏡下觀察如有局部不均勻現(xiàn)象,，可以采取敲擊法，具體操作如下：將板子置于臺(tái)面上,，左手持住板子的左邊,，右手輕輕敲擊板子的右邊緣(5-8次)，力度太強(qiáng)或次數(shù)太多會(huì)反而更易導(dǎo)致細(xì)胞聚集,。將板子順時(shí)針旋轉(zhuǎn),，依次敲擊剩余三個(gè)邊（據(jù)說(shuō)逆時(shí)針效果不好），靜置約5-10分鐘后,，放入37℃培養(yǎng)箱,。

對(duì)于6孔板、12孔板或24孔板,，為防止表面張力導(dǎo)致的中間液面太低細(xì)胞聚集的現(xiàn)象,。通常每孔首先滴加少量培基,，輕輕晃動(dòng)浸潤(rùn)整個(gè)孔底以保證板子的孔底都是濕潤(rùn)的，這樣加液后細(xì)胞懸液會(huì)平鋪在整個(gè)孔底,，可以避免加在中間位置和加在周邊晃勻后周邊細(xì)胞局部太多的現(xiàn)象,，細(xì)胞分散會(huì)較均勻。注意加完細(xì)胞懸液后要放工作臺(tái)靜置一下（5-10分鐘）,。鏡下觀察細(xì)胞均勻度,，如不均勻可采用以下8字法、十字法及震蕩法等方法進(jìn)行細(xì)胞均勻度處理,。具體操作如下：

 方法一(8字法)：這種方法也是大家最常見的細(xì)胞搖勻方法,。橫向8字搖勻法參考下圖,，搖動(dòng)次數(shù)根據(jù)鏡下觀察和個(gè)人力度具體分析（參考：保證液體不被晃動(dòng)出去,，8字晃動(dòng)5次理論上就可以基本晃勻）。搖勻結(jié)束,，切忌在鏡下移動(dòng)觀察視野太久,，以免伴隨著輕微的移動(dòng)，細(xì)胞又往中間聚集,。

方法二(十字法): 細(xì)胞鋪完板后,，在水平方向上，上下左右四個(gè)方向進(jìn)行移動(dòng),，呈十字形狀,，重復(fù)5-6次。有些同學(xué)覺(jué)得十字法搖勻效果并不好,，方法關(guān)鍵的是搖完后最好直接放入培養(yǎng)箱中,，不要再做過(guò)多的移動(dòng)（也有同學(xué)建議可以在培養(yǎng)箱中搖勻）。另外,，同樣不建議放到鏡下長(zhǎng)時(shí)間去觀察,。

方法三(十字類似法)：細(xì)胞鋪完板后，放在水平板面上先上下移動(dòng),，再左右移動(dòng),，每個(gè)方向5-6次。其他具體操作同十字法,。

方法四(震蕩法)：細(xì)胞懸液加完后,，將細(xì)胞培養(yǎng)板抬高，對(duì)著燈光,，從底部往上看,，看細(xì)胞有沒(méi)有抱團(tuán)。然后從底部敲擊,，使之分散,。如果實(shí)驗(yàn)室有平板振蕩器的話,，我建議用這個(gè)儀器稍振蕩一下，效果不錯(cuò),，就是振幅小,，頻率高的那種。（個(gè)人不太推薦這種方法,，板子接觸振蕩器后增加了染菌的風(fēng)險(xiǎn),，而且轉(zhuǎn)速的調(diào)節(jié)和時(shí)間的掌握比較困難）。
以上就是有關(guān)于細(xì)胞鋪板不勻的解決方法有哪些的問(wèn)題解答,，如果你有更多問(wèn)題請(qǐng)咨詢百奧創(chuàng)新客服哦,！