如何讓支原體遠(yuǎn)離你的細(xì)胞
據(jù)粗略估計(jì),,大約三分之一的細(xì)胞培養(yǎng)物都感染了支原體,。這些小東西神不知鬼不覺,,侵入你的細(xì)胞。由于它們體積小,,生長緩慢,,所以難以察覺。但是,,它們的存在又確實(shí)改變了細(xì)胞的代謝過程,,繼而干擾你的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,或造成無法解釋的差異,。更糟的是,,拯救被感染的細(xì)胞幾乎是不可能的任務(wù)。因此,,就支原體污染而言,,預(yù)防是**要?jiǎng)?wù)。
細(xì)胞來源是關(guān)鍵
支原體污染的*常見原因之一是引入的培養(yǎng)物已經(jīng)被感染,。一旦進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室,,這些小東西會(huì)蔓延到每個(gè)角落,讓你崩潰,。要避免這種情況,,*簡單的辦法就是不從其他實(shí)驗(yàn)室要細(xì)胞,而從供應(yīng)商或菌種保藏中心(ATCC或ECACC)購買,,這些細(xì)胞經(jīng)過嚴(yán)格檢測,確保不含有支原體,。
如果購買有難度,,或基于其他原因,不得不使用其他實(shí)驗(yàn)室的細(xì)胞,,那么也要保持警惕,,在單獨(dú)的培養(yǎng)箱中隔離,同時(shí)進(jìn)行支原體的檢測,。市場上有多家公司提供支原體檢測試劑盒,,你可自行選擇。
定期檢測很重要
即使實(shí)驗(yàn)室沒有新來的細(xì)胞,,支原體也可能通過操作人員傳遞到現(xiàn)有的培養(yǎng)物,。當(dāng)然,操作人員并不知道,。支原體污染的另一條路線是通過你的細(xì)胞培養(yǎng)試劑,。培養(yǎng)基、酶這些常用試劑,也有可能被支原體污染,。
盡管無法避免人或試劑的污染,,但常規(guī)檢測也能避免情況惡化。也許,,當(dāng)支原體初次感染時(shí),,我們未必能檢測到,但盡早發(fā)現(xiàn),,就能防止這種微生物的傳播,,避免大的損失。
支原體檢測有很多種,。直接培養(yǎng)方法雖然準(zhǔn)確率高,,但需要三到四周的時(shí)間。因此,,我們在常規(guī)檢測中使用間接檢測方法已足夠,,若發(fā)現(xiàn)陽性,則后續(xù)可采用較為繁瑣的直接檢測,。常見的間接檢測方法有基于酶活性的熒光和生化分析,、PCR分析、**分析等,。
無菌操作要做好
支原體污染的另一個(gè)主要源頭是無菌操作不佳,。盡管良好的操作可能是*簡單的預(yù)防措施,但說起來容易,,做起來難,。每個(gè)人都會(huì)犯錯(cuò),特別是在重復(fù)勞動(dòng)時(shí),。因此,,實(shí)驗(yàn)室應(yīng)不定期開展培訓(xùn)和監(jiān)督,以便讓每個(gè)人都充分認(rèn)識(shí)到支原體的破壞性,。
許多實(shí)驗(yàn)室目前仍使用***,,但細(xì)胞培養(yǎng)人員逐漸認(rèn)識(shí)到這是不負(fù)責(zé)任的,因?yàn)樗鼛砹四退幬⑸锏膯栴},。相反,,*好依賴自身的無菌操作來預(yù)防支原體,而只有在懷疑或確認(rèn)感染的時(shí)候才使用***,。
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