原理
利用脂肪能溶于有機溶劑的性質,在索氏提取器中將樣品用無水乙mi或石油mi等溶劑反復萃取,,提取樣品中的脂肪后,,蒸去溶劑,所得的物質即為脂肪或稱粗脂肪,。
3,、儀器與試劑
3.1 索氏提取器 如圖3-3所示,。
3.2 電熱恒溫鼓風干燥箱,。
3.3 干燥器,。
3.4 恒溫水浴箱,。
3.5 濾紙筒。
3.6 無水乙mi(不含過氧化物)或石油mi(沸程30℃~60℃)
4,、測定步驟
4.1 樣品處理
4.1.1 固體樣品: 準確稱取均勻樣品2g~5g(J確至0.01mg),,裝入濾紙筒內。
4.1.2 液體或半固體: 準確稱取均勻樣品5g~10g(J確至0.01mg),,置于蒸發(fā)皿中,加入海砂約20g,攪勻后于沸水浴上蒸干,然后在95℃~105℃下干燥,。研細后全部轉入濾紙筒內,用沾有乙mi的脫脂棉擦凈所用器皿,,并將棉花也放入濾紙筒內,。
4.2 索氏提取器的清洗
將索氏提取器各部位充分洗滌并用蒸餾水清洗后烘干。脂肪燒瓶在103℃±2℃的烘箱內干燥至恒重(前后兩次稱量差不超過2mg),。
4.3 樣品測定
4.3.1 將濾紙筒放入索氏提取器的抽提筒內,,連接已干燥至恒重的脂肪燒瓶,由抽提器冷凝管上端加入乙mi或石油醚至瓶內容積的2/3處,,通入冷凝水,,將底瓶浸沒在水浴中加熱,,用一小團脫脂棉輕輕塞入冷凝管上口。
4.3.2 抽提溫度的控制:水浴溫度應控制在使提取液在每6min~8min回流一次為宜,。
4.3.3 抽提時間的控制: 抽提時間視試樣中粗脂肪含量而定,,一般樣品提取6h~12h,堅果樣品提取約16h,。提取結束時,,用毛玻璃板接取一滴提取液,如無油斑則表明提取完畢,。
4.3.4 提取完畢,。取下脂肪燒瓶,回收乙mi或石油mi,。待燒瓶內乙mi僅剩下1~2mL時,在水浴上趕盡殘留的溶劑,,于95℃~105℃下干燥2h后,,置于干燥器中冷卻至室溫,稱量,。繼續(xù)干燥30min后冷卻稱量,,反復干燥至恒重(前后兩次稱量差不超過±2mg)。
5,、結果計算
5.1 數(shù)據(jù)記錄表
樣品的質量m/g 脂肪燒瓶的質量m0/g 脂肪和脂肪燒瓶的質量(m1)(單位:g)
次 D二次 D三次 恒重值
5.2 計算公式
X(%)= ×100
式中:X—樣品中粗脂肪的質量百分數(shù),,單位(%)。
m—-樣品的質量, 單位(g),;
m0 —脂肪燒瓶的質量, 單位(g),;
m1 —脂肪和脂肪燒瓶的質量, 單位(g)。
6,、注意事項
6.1 抽提劑乙mi是易燃,,易爆物質,應注意通風并且不能有火源,。
6.2 樣品濾紙筒的高度不能超過虹吸管,,否則上部脂肪不能提盡而造成誤差。
6.3 樣品和醚浸出物在烘箱中干燥時,,時間不能過長,,以防止不飽和的脂肪酸受熱氧化而增加質量。
6.4 乙mi若放置時間過長,,會產生過氧化物,。過氧化物不穩(wěn)定,當蒸餾或干燥時會發(fā)生,,故使用前應嚴格檢查,,并除去過氧化物,。
6.4.1 檢查方法:取5mL乙mi于試管中,加KI(100g/L)溶液1mL,,充分振搖1min,。靜置分層。若有過氧化物則放出游離碘,,水層是黃色(或加4滴5 g/L淀粉指示劑顯藍色),,則該乙mi需處理后使用。
6.4.2 去除過氧化物的方法:將乙mi倒入蒸餾瓶中加一段無銹鐵絲或鋁絲,,收集重蒸餾乙mi,。
6.5 反復加熱可能會因脂類氧化而增重,質量增加時,,以增重前的質量為恒重,。
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