1,、主要懷疑點:洗板不充分:
1.1、機器洗版:確保機器設(shè)置的針頭能吸干孔中液體,,并且加液針頭能加液大于350ul,,加液針頭沒有被異物或者結(jié)晶鹽堵住。
1.2,、手動洗板,,嚴格按照步驟,使用干凈滅菌的槍頭和加樣槽,,使用無氧化劑的吸水紙,。加350ul洗液,靜置90秒,,在吸水紙上拍干孔中液體后再加入下一步洗液或者試劑,。
1.3、特別注意,,在加入TMB前的洗板步驟極其重要,,殘留的HRP酶會直接導(dǎo)致TMB顯色。
2,、次要懷疑點:
2.1,、TMB 已經(jīng)污染,檢測TMB是否透明無色,,如果偏藍就是污染了,。
2.2、檢查配制洗液的水是否污染,,要求使用的水是雙蒸水,,三蒸水或無離子水,水中的Fe3+,Cu3+,Co3+等過渡金屬,,以及HClO都會氧化TMB,。
2.3、酶標板受潮,,長霉,,或者試劑過期。
2.4,、環(huán)境污染,,空氣中有導(dǎo)致顯色的物質(zhì)或者粉塵。
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