胎牛血清如何解凍

胎牛血清在生物醫(yī)學研究,，以及細胞培養(yǎng)領(lǐng)域中,，應(yīng)用廣泛。胎牛血清含有豐富的生長因子,、蛋白質(zhì)和其他生物分子,，對細胞生長和增殖具有重要作用。使用胎牛血清,，先要將其解凍融化,。融化胎牛血清時采取正確的方法非常重要，不正確的解凍過程可能會導(dǎo)致?lián)p壞或降低血清的有效性,，影響到實驗的可重復(fù)性和準確性,。那么你知道胎牛血清該如何解凍嗎？讓我們一起來看看吧,！

一,、解凍方法

胎牛血清中珍貴的生長因子等活性物質(zhì)，它們在解凍過程中,，有著與細胞復(fù)蘇類似的經(jīng)歷,，都需要快速解凍才能最da程度地保留生物活性。

4℃過夜這樣的長時間處理，很有可能會導(dǎo)致一部分的損失,，影響細胞生長,，為了更好地保留胎牛血清中的活性成分，使細胞培養(yǎng)更穩(wěn)定,，我們推薦使用三步法解凍胎牛血清,。

 如果是儲存在-80℃的胎牛血清，則需提前幾天先轉(zhuǎn)移至-20℃冰箱中（至少24小時）,，再使用三步法溶解,，避免溫差過大使血清失活。

徹di解凍胎牛血清后,，可以根據(jù)實驗需求,，將其分裝，保證每一份夠一次使用量即可,，比如：25ml/管,、50ml/管等。密封好后趕緊放回-20℃冰箱繼續(xù)儲存,。需要配制培養(yǎng)基的時候,，再從-20℃冰箱中取出一管來解凍使用，可以有效避免反復(fù)凍融的問題（遵循現(xiàn)用現(xiàn)配,、現(xiàn)配現(xiàn)解凍的原則）,。配好的培養(yǎng)基可以放到4℃冰箱進行儲存。

二,、常見問題

1. 胎牛血清有絮狀沉淀：

把血清置于37℃中過久，或者沒有階梯解凍,，還有解凍水浴時振蕩不足導(dǎo)致局部溫差過大等原因,，都會使血清產(chǎn)生一些沉淀。

正確的處理方法：可以等待其自然沉降,，然后取上清液使用,。若比較急用、或者絮狀沉淀過于分散以至于無法取上清,，可以2000～3000rpm離心5min,。不推薦使用過濾法，血清的蛋白容易導(dǎo)致濾膜堵塞,。熱滅活之后的血清更容易產(chǎn)生沉淀,。

2. 熱滅活？血清熱滅活是什么,，有必要熱滅活嗎,？

血清熱滅活主要是為了除去對熱敏感的補體。

補體是廣泛存在于人和脊椎動物體血清及組織液中，不耐熱,，活化后具有酶活性,、可介導(dǎo)免疫應(yīng)答和炎癥反應(yīng)的一類蛋白質(zhì)。補體的作用包括但不限于調(diào)理吞噬,、裂解細胞,、介導(dǎo)炎癥、免疫調(diào)節(jié)和清除免疫復(fù)合物等,。但由于胎牛胎齡8個月以下,，尚未形成完善的補體系統(tǒng)，對免疫實驗的影響較小,，而熱滅活血清反而會使血清中的很多重要微量生長因子分解流失,，因此大部分實驗不推薦熱滅活血清。

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