影響色譜柱性能的物理參數(shù)有哪些,？

來源：廣州太瑋生物科技有限公司 2024年01月08日 10:04

HPLC（高效液相色譜）是一種常用的分析技術(shù)，被廣泛應(yīng)用于化學(xué),、生物,、醫(yī)藥等領(lǐng)域,。色譜柱是HPLC系統(tǒng)中的核心部件，通常由填料材料和柱壁組成,。填料材料可以是各種各樣的,，比如疏水相和親水相。而柱壁則是填料與流動(dòng)相之間的隔離層,，它能夠保護(hù)填料的結(jié)構(gòu)，同時(shí)也能影響分離效果,。

(1) 硅膠純度

硅膠純度和殘留金屬離子濃度，硅膠的雜質(zhì)會(huì)影響化合物的峰形,，硅膠表面的金屬含量高會(huì)影響堿性化合物的峰形,，易發(fā)生拖尾。

(2) 色譜柱尺寸

填料床的長度和內(nèi)徑,，增加色譜柱長度,，可以在一定程度上提高柱效，但也會(huì)升高壓力和導(dǎo)致峰展寬,；寬柱徑,，提高載樣量，但也會(huì)增加橫向擴(kuò)散,，同樣會(huì)導(dǎo)致峰展寬,。窄柱徑可以節(jié)約溶劑，可減少橫向擴(kuò)散,，但壓力較大,，對(duì)系統(tǒng)要求較高。

(3) 顆粒形狀及粒徑

球形顆粒柱效高,、重現(xiàn)性好,、柱床結(jié)構(gòu)均勻，不規(guī)則形柱床結(jié)構(gòu)不均勻,、流動(dòng)相線速度不均勻,，容易譜帶展寬；平均顆粒直徑,，粒徑越小,，柱效越高，柱壓也越高,。粒徑分布越廣則柱效越低,，壓力越大。

(4) 顆粒表面積

顆粒外表面和內(nèi)部孔表面的總和,，以m2/g表示,，相對(duì)而言高表面積對(duì)樣品具有較強(qiáng)的保留能力,，更大的柱容量和分離度。而低表面積能更快達(dá)到平衡狀態(tài),，更適合梯度洗脫程序,。

(5) 孔徑

顆粒的孔或腔的平均尺寸，范圍是80~300Å,，大孔徑的填料顆?？梢匝娱L大分子溶質(zhì)在填料表面的滯留時(shí)間，改善分離,，所以大孔徑填料適合分離大分子化合物或者水動(dòng)力體積較大的分子,。

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