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一,、細(xì)胞培養(yǎng)程序：
A,、目的：將培養(yǎng)于培養(yǎng)箱中的細(xì)胞進(jìn)行繼代培養(yǎng)，或是因應(yīng)實(shí)驗(yàn)需求進(jìn)行分盤,。
B,、操作程序：
1、實(shí)行注意事項(xiàng) H 中操作前的準(zhǔn)備步驟,。
2,、將 Flask 自培養(yǎng)箱中取出，于操作臺(tái)中用幫浦及巴斯特滴管抽去所有溶液,。
3,、用滴管吸取 10 ml PBS 溶液，加入至 Flask 中,，以輕微搖晃的方式潤(rùn)洗細(xì)胞層,，之后用相同一支滴管將 PBS 溶液吸取至一干凈燒杯回收廢溶液。
4,、拿取一只新滴管,，重復(fù)步驟 3。（步驟3,、4是為去除原有培養(yǎng)基當(dāng)中的 FBS,，以免 FBS 中和酵素的作用，使細(xì)胞壁上的黏附蛋白質(zhì)無(wú)法被酵素分解,，細(xì)胞會(huì)無(wú)法懸浮起來(lái),，無(wú)法取出細(xì)胞）
5,、用一滴管吸取 2 ml 酵素溶液，加入至 Flask 當(dāng)中,，放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 5-10分鐘,。
6、用滴管加入 8 ml 新鮮培養(yǎng)基于 Flask 中,，混合均勻后可用同一支滴管取出所有溶液,，置于一干凈離心管。
7,、將離心管放置于離心機(jī)中,，以 1500 rpm 離心 5 分鐘。
8,、于生物操作柜中,，以幫浦與巴斯特滴管抽去上方殘余溶液。
9,、此時(shí)視分盤狀況需要,，加入適量的培養(yǎng)基，以滴管吸放的方式將沉淀的細(xì)胞重新懸浮起來(lái),，將全數(shù)溶液平均分配至分盤的容器當(dāng)中,。（需計(jì)算此時(shí)在每個(gè)容器當(dāng)中的量有多少）
10、補(bǔ)充培養(yǎng)基至容器的合適容量,。（注意事項(xiàng) B）
11,、放入培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)或是進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。至此完成細(xì)胞培養(yǎng)的程序,。
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