一、微生物實驗室設計
微生物實驗室由準備室、洗滌室,、滅菌室、無菌室,、恒溫培養(yǎng)室和普通實驗室六部分組成,。這些房間的共同特點是地板和墻壁的質(zhì)地光滑堅硬,儀器和設備的陳設簡潔,,便于打掃衛(wèi)生,。
二、微生物實驗室基本要求
1,、準備室用于配制培養(yǎng)基和樣品處理等,。室內(nèi)設有試劑柜、存放器具或材料的專柜,、實驗臺,、電爐,、冰箱和上下水道、電源等,。
2,、洗滌室用于洗刷器皿等。由于使用過的器皿已被微生物污染,,有時還會存在病原微生物,。因此,在條件允許的情況下,,設置洗滌室,。室內(nèi)應備有加熱器、蒸鍋,,洗刷器皿用的盆,、桶等,還應有各種瓶刷,、去污粉,、肥皂、洗衣粉等,。
3,、滅菌室主要用于培養(yǎng)基的滅菌和各種器具的滅菌,室內(nèi)應備有高壓蒸汽滅菌器,、烘箱等滅菌設備及設施,。
4、無菌室也稱接種室,,是系統(tǒng)接種,、純化菌種等無菌操作的專用實驗室。在微生物中,,菌種的接種移植是一項主要操作,,這項操作的特點就是要保證菌種純種,防止雜菌的污染,。在一般環(huán)境的空氣中,,由于存在許多塵埃和雜菌,很易造成污染,,對接種工作干擾很大,。
1.無菌室的設置
無菌室應根據(jù)既經(jīng)濟又科學的原則來設置。其基本要求有以下幾點:
(1)無菌室應有內(nèi),、外兩間,,內(nèi)間是無菌室,外間是緩沖室。房間容積不宜過大,,以便于空氣滅菌,。最小內(nèi)間面積2×2.5=5m2,外間面積1×2=2m2,,高以2.5m以下為宜,,都應有天花板。
(2)內(nèi)間應當設拉門,,以減少空氣的波動,,門應設在離工作臺最遠的位置上;外間的門也用拉門,,要設在距內(nèi)間最遠的位置上,。
(3)在分隔內(nèi)間與外間的墻壁或“隔扇”上,應開一個小窗,,作接種過程中必要的內(nèi)外傳遞物品的通道,,以減少人員進出內(nèi)間的次數(shù),降低污染程度,。小窗寬60cm,、高40cm、厚30cm,,內(nèi)外都掛對拉的窗扇,。
(4)無菌室容積小而嚴密,使用一段時間后,,室內(nèi)溫度很高,,故應設置通氣窗。通氣窗應設在內(nèi)室進門處的頂棚上(即離工作臺最遠的位置),,為雙層結構,,外層為百葉窗,內(nèi)層可用抽板式窗扇,。通氣窗可在內(nèi)室使用后,、滅菌前開啟,以流通空氣,。有條件可安裝恒溫恒濕機,。
2. 無菌室內(nèi)設備和用具
(1)無菌室內(nèi)的工作臺,不論是什么材質(zhì),、用途的,都要求表面光滑和臺面水平,。
(2)在內(nèi)室和外室各安裝一個紫外燈(多為30W),。內(nèi)室的紫外線燈應安裝在經(jīng)常工作的座位正上方,離地面2m,外室的紫外線燈可安裝在外室中央,。
(3)外室應有專用的工作服,、鞋、帽,、口罩,、盛有來蘇兒水的瓷盆和毛巾、手持噴霧器和5%石炭酸溶液等,。
(4)內(nèi)室應有酒精燈,、常用接種工具、不銹鋼制的刀,、剪,、鑷子、70%的酒精棉球,、工業(yè)酒精,、載玻璃片、特種蠟筆,、記錄本,、鉛筆、標簽紙,、膠水,、廢物筐等。
3. 無菌室的滅菌消毒
(1)薰蒸:這是無菌室滅菌的措施,。無菌室使用了較長時間,,污染比較嚴重時,應進行薰蒸滅菌,??捎眉兹⑷樗峄蜣拐?。
(2)噴霧:在每次使用無菌室前進行,。噴霧可促使空氣中微粒及微生物沉降,防止桌面,、地面上的微塵飛場,,并有殺菌作用??捎?%石炭酸噴霧,。
(3)紫外線照射:在每次使用無菌室前進行。紫外線有較好的殺菌效果,。通常應開啟紫外線燈照射30~60min,。
4. 無菌室工作規(guī)程
(1)無菌室滅菌,。每次使用前開啟紫外線燈照射30min以上,或在使用前30min,,對內(nèi)外室用5%石炭酸噴霧,。
(2)用肥皂洗手后,把所需器材搬入外室,;在外室換上已滅菌的工作服,、工作帽和工作鞋,戴好口罩,,然后用2%煤酚皂液將手浸洗2分鐘,。
(3)將各種需用物品搬進內(nèi)室清點、就位,,用5%石炭酸在工作臺面上方和操作員站位空間噴霧,,返回外室,5~10min后再進內(nèi)室工作,。
(4)接種操作前,,用70%酒精棉球擦手;進行無菌操作時,,動作要輕緩,,盡量減少空氣波動和地面揚塵。
(5)工作中應注意安全,。如遇棉塞著火,,用手緊握或用濕布包裹熄滅,切勿用嘴吹,,以免擴大燃燒,;如遇有菌培養(yǎng)物灑落或打碎有菌容器時,浸潤5%石炭酸的抹布包裹后,,并用浸潤5%石炭酸的抹布擦拭臺面或地面,,用酒精棉球擦手后再繼續(xù)操作。
(6)工作結束,,立即將臺面收拾干凈,,將不應在無菌室存放的物品和廢棄物全部拿出無菌室后,對無菌室用5%石炭酸噴霧,,或開紫外線燈照射30min,。
三、恒溫培養(yǎng)室
1. 培養(yǎng)室的設置
(1)培養(yǎng)室應有內(nèi),、外兩間,,內(nèi)室是培養(yǎng)室,外室是緩沖室,。房間容積不宜大,,以利于空氣滅菌,,內(nèi)室面積在3.2×4.4=14m2左右,外室面積在3.2×1.8=6m2左右,,高以2.5m左右為宜。
(2)分隔內(nèi)室與外室的墻壁上部應設帶空氣過濾裝置的通風口,。
(3)為滿足微生物對溫度的需要,,需安裝恒溫恒濕機。
(4)內(nèi)外室都應在室中央安裝紫外線燈,,以供滅菌用,。
2. 培養(yǎng)室內(nèi)設備及用具
(1)內(nèi)室通常配備培養(yǎng)架和搖瓶機(搖床)。常用的搖瓶機有旋轉式,、往復式兩種,。
(2)外室應有專用的工作服、鞋,、帽,、口罩、手持噴霧器和5%石炭酸溶液,、70%酒精棉球等,。
( 3 )培養(yǎng)室的滅菌、消毒 同無菌室的滅菌,、消毒措施,。小規(guī)模的培養(yǎng)可不啟用恒溫培養(yǎng)室,而在恒溫培養(yǎng)箱中進行,。
( 4 ) 普通實驗室進行微生物的觀察,、計數(shù)和生理生化測定工作的場所。室內(nèi)的陳設因工作側重點不同而有很大的差異,。一般均配備實驗臺,、顯微鏡、柜子及凳子,。實驗臺要求平整,、光滑,實驗柜要足以容納日常使用的用具及藥品等,。
( 5 )實驗室其他要求水,、電、氣等的容量,、布設,、性能均應滿足實驗室工作的需要。
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