一,、微生物實驗室設(shè)計
微生物實驗室由準(zhǔn)備室,、洗滌室,、滅菌室,、無菌室,、恒溫培養(yǎng)室和普通實驗室六部分組成,。這些房間的共同特點是地板和墻壁的質(zhì)地光滑堅硬,儀器和設(shè)備的陳設(shè)簡潔,,便于打掃衛(wèi)生,。
二、微生物實驗室基本要求
1,、準(zhǔn)備室用于配制培養(yǎng)基和樣品處理等,。室內(nèi)設(shè)有試劑柜、存放器具或材料的專柜,、實驗臺,、電爐、冰箱和上下水道,、電源等,。
2、洗滌室用于洗刷器皿等,。由于使用過的器皿已被微生物污染,,有時還會存在病原微生物。因此,,在條件允許的情況下,,設(shè)置洗滌室。室內(nèi)應(yīng)備有加熱器,、蒸鍋,,洗刷器皿用的盆、桶等,,還應(yīng)有各種瓶刷,、去污粉、肥皂,、洗衣粉等,。
3,、滅菌室主要用于培養(yǎng)基的滅菌和各種器具的滅菌,室內(nèi)應(yīng)備有高壓蒸汽滅菌器,、烘箱等滅菌設(shè)備及設(shè)施,。
4、無菌室也稱接種室,,是系統(tǒng)接種,、純化菌種等無菌操作的專用實驗室。在微生物中,,菌種的接種移植是一項主要操作,,這項操作的特點就是要保證菌種純種,防止雜菌的污染,。在一般環(huán)境的空氣中,,由于存在許多塵埃和雜菌,很易造成污染,,對接種工作干擾很大,。
1.無菌室的設(shè)置
無菌室應(yīng)根據(jù)既經(jīng)濟又科學(xué)的原則來設(shè)置。其基本要求有以下幾點:
(1)無菌室應(yīng)有內(nèi),、外兩間,,內(nèi)間是無菌室,外間是緩沖室,。房間容積不宜過大,,以便于空氣滅菌。最小內(nèi)間面積2×2.5=5m2,,外間面積1×2=2m2,,高以2.5m以下為宜,都應(yīng)有天花板,。
(2)內(nèi)間應(yīng)當(dāng)設(shè)拉門,,以減少空氣的波動,門應(yīng)設(shè)在離工作臺最遠(yuǎn)的位置上,;外間的門也用拉門,,要設(shè)在距內(nèi)間最遠(yuǎn)的位置上,。
(3)在分隔內(nèi)間與外間的墻壁或“隔扇”上,,應(yīng)開一個小窗,作接種過程中必要的內(nèi)外傳遞物品的通道,,以減少人員進(jìn)出內(nèi)間的次數(shù),,降低污染程度。小窗寬60cm,、高40cm,、厚30cm,,內(nèi)外都掛對拉的窗扇。
(4)無菌室容積小而嚴(yán)密,,使用一段時間后,,室內(nèi)溫度很高,故應(yīng)設(shè)置通氣窗,。通氣窗應(yīng)設(shè)在內(nèi)室進(jìn)門處的頂棚上(即離工作臺最遠(yuǎn)的位置),,為雙層結(jié)構(gòu),外層為百葉窗,,內(nèi)層可用抽板式窗扇,。通氣窗可在內(nèi)室使用后、滅菌前開啟,,以流通空氣,。有條件可安裝恒溫恒濕機。
2. 無菌室內(nèi)設(shè)備和用具
(1)無菌室內(nèi)的工作臺,,不論是什么材質(zhì),、用途的,都要求表面光滑和臺面水平,。
(2)在內(nèi)室和外室各安裝一個紫外燈(多為30W),。內(nèi)室的紫外線燈應(yīng)安裝在經(jīng)常工作的座位正上方,離地面2m,,外室的紫外線燈可安裝在外室中央,。
(3)外室應(yīng)有專用的工作服、鞋,、帽,、口罩、盛有來蘇兒水的瓷盆和毛巾,、手持噴霧器和5%石炭酸溶液等,。
(4)內(nèi)室應(yīng)有酒精燈、常用接種工具,、不銹鋼制的刀,、剪、鑷子,、70%的酒精棉球,、工業(yè)酒精、載玻璃片,、特種蠟筆,、記錄本、鉛筆、標(biāo)簽紙,、膠水,、廢物筐等。
3. 無菌室的滅菌消毒
(1)薰蒸:這是無菌室滅菌的措施,。無菌室使用了較長時間,,污染比較嚴(yán)重時,應(yīng)進(jìn)行薰蒸滅菌,??捎眉兹⑷樗峄蜣拐?。
(2)噴霧:在每次使用無菌室前進(jìn)行,。噴霧可促使空氣中微粒及微生物沉降,防止桌面,、地面上的微塵飛場,,并有殺菌作用??捎?%石炭酸噴霧,。
(3)紫外線照射:在每次使用無菌室前進(jìn)行。紫外線有較好的殺菌效果,。通常應(yīng)開啟紫外線燈照射30~60min,。
4. 無菌室工作規(guī)程
(1)無菌室滅菌。每次使用前開啟紫外線燈照射30min以上,,或在使用前30min,,對內(nèi)外室用5%石炭酸噴霧。
(2)用肥皂洗手后,,把所需器材搬入外室,;在外室換上已滅菌的工作服、工作帽和工作鞋,,戴好口罩,,然后用2%煤酚皂液將手浸洗2分鐘。
(3)將各種需用物品搬進(jìn)內(nèi)室清點,、就位,,用5%石炭酸在工作臺面上方和操作員站位空間噴霧,返回外室,,5~10min后再進(jìn)內(nèi)室工作,。
(4)接種操作前,用70%酒精棉球擦手,;進(jìn)行無菌操作時,,動作要輕緩,,盡量減少空氣波動和地面揚塵。
(5)工作中應(yīng)注意安全,。如遇棉塞著火,,用手緊握或用濕布包裹熄滅,切勿用嘴吹,,以免擴大燃燒;如遇有菌培養(yǎng)物灑落或打碎有菌容器時,,浸潤5%石炭酸的抹布包裹后,,并用浸潤5%石炭酸的抹布擦拭臺面或地面,用酒精棉球擦手后再繼續(xù)操作,。
(6)工作結(jié)束,,立即將臺面收拾干凈,將不應(yīng)在無菌室存放的物品和廢棄物全部拿出無菌室后,,對無菌室用5%石炭酸噴霧,,或開紫外線燈照射30min。
三,、恒溫培養(yǎng)室
1. 培養(yǎng)室的設(shè)置
(1)培養(yǎng)室應(yīng)有內(nèi),、外兩間,內(nèi)室是培養(yǎng)室,,外室是緩沖室,。房間容積不宜大,以利于空氣滅菌,,內(nèi)室面積在3.2×4.4=14m2左右,,外室面積在3.2×1.8=6m2左右,高以2.5m左右為宜,。
(2)分隔內(nèi)室與外室的墻壁上部應(yīng)設(shè)帶空氣過濾裝置的通風(fēng)口,。
(3)為滿足微生物對溫度的需要,需安裝恒溫恒濕機,。
(4)內(nèi)外室都應(yīng)在室中央安裝紫外線燈,,以供滅菌用。
2. 培養(yǎng)室內(nèi)設(shè)備及用具
(1)內(nèi)室通常配備培養(yǎng)架和搖瓶機(搖床),。常用的搖瓶機有旋轉(zhuǎn)式,、往復(fù)式兩種。
(2)外室應(yīng)有專用的工作服,、鞋,、帽、口罩,、手持噴霧器和5%石炭酸溶液,、70%酒精棉球等,。
( 3 )培養(yǎng)室的滅菌、消毒 同無菌室的滅菌,、消毒措施,。小規(guī)模的培養(yǎng)可不啟用恒溫培養(yǎng)室,而在恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行,。
( 4 ) 普通實驗室進(jìn)行微生物的觀察,、計數(shù)和生理生化測定工作的場所。室內(nèi)的陳設(shè)因工作側(cè)重點不同而有很大的差異,。一般均配備實驗臺,、顯微鏡、柜子及凳子,。實驗臺要求平整,、光滑,實驗柜要足以容納日常使用的用具及藥品等,。
( 5 )實驗室其他要求水,、電、氣等的容量,、布設(shè),、性能均應(yīng)滿足實驗室工作的需要。
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