患者組（來自6個不同中心）：

213例T1DM患者，男：女比54.3%：45.7%,，平均年齡11.5±4.2歲,。54例為新發(fā)病例（診斷1年內），79例為診斷后5年內,，80例為診斷后5年以上,。

疾病對照組：

110名年齡和性別與患者組匹配的門診患者，男：女比51.8%：48.2%，平均年齡9.6±4.9歲,。凡滿足糖尿病,、相關家族史，以及最常見的糖尿病相關自身免疫性疾病(如乳糜瀉,、橋本甲狀腺炎)三者其一的患者均從對照組中剔除,。

   檢測方法：

1. ZnT8A的檢出率

106/213(49.8%)的T1DM患者檢測到ZnT8A陽性，而對照組僅有3/110 (2.7%)檢測到ZnT8A陽性 (p<0.0001,，圖1),。這3例ZnT8陽性樣本中，其中兩例其他四項自身抗體均為陰性,，剩余一例樣本,，ZnT8A測得濃度為1554 AU/mL, 伴GADA和IA-2A強陽性，提示該患兒是未來5年內發(fā)展為糖尿病的高危兒童,。

ZnT8A檢出率在低齡患者中較高,，0 ~ 6歲組、7 ~ 12歲組和13 ~ 18歲組的陽性率分別為56.3%(18/32),、48.7%(37/76)和48.6%(51/105),，但差異無統(tǒng)計學意義(p > 0.05)。

圖1 ZnT8A在T1DM患者組和對照組中的檢出情況,。

2. 不同病程患者組中抗體檢出率

在新發(fā)病患者中,，ZnT8A與GADA的檢出率相近，為61.1%,，在病程1年內的患者中,，IA-2A與GADA表現(xiàn)出更高的檢出率，而ZnT8A檢出率相對穩(wěn)定,；在病程5年以上的患者中GADA保持較高的檢出率,，而ZnT8A與IA-2A呈顯著下降。

圖2 不同病程組中抗體的陽性檢出率

3. 聯(lián)合ZnT8A檢測提高檢出率

4/54例(7.4%)新發(fā)患者表現(xiàn)為ZnT8A抗體單陽,，2/54例表現(xiàn)為ZnT8A和ICA雙陽,，因此，ZnT8A檢測可將新發(fā)病患者組中自身抗體的陽性檢出率從40/54(74.1%)增加到46/54(85.2%),。在其余患者組中(病程≥1年),，有4例ZnT8A單陽患者，使實驗室檢查的總體診斷靈敏度從85.9%提高到90.6%,。

通過ELISA法分析了131例患者的IAA水平,。131例患者中，IAA陽性41例,，占比32.1%,。新發(fā)患者組(29例)中僅2例(6.9%)IAA呈弱陽性,。由于IAA的ELISA檢測在新發(fā)病時的靈敏度極低，且在隨訪中無法區(qū)分外源性和內源性胰島素的抗體,，因此本研究沒有主要考慮ZnT8A與IAA的比較和相關性,。

4. GADA、IA-2A,、ZnT8A在ICA陽性和ICA陰性患者中的檢出率

具有ICA-IIF回顧性資料的患者中,，35.4%(46/130例)患者報告為ICA陽性。相比之下,，這130例患者中GADA陽性75例(57.7%),，IA-2A陽性57例(43.8%)，ZnT8A陽性60例(46.2%),。因此,，ICA的整體靈敏度遠低于GADA、IA-2A和ZnT8A自身抗體,。此外,，如表1所示，在ICA陰性的患者中,，有很大比例(66/84, 78.6%)的患者至少有一種其他自身免疫標志物陽性,，而在ICA陽性的患者中，只有4例(4/ 46, 8.7 %)的患者其他自身抗體陰性,。值得注意的是,，在35例新發(fā)病患者中沒有1例ICA單陽患者，而在23例ICA陰性新發(fā)患者中,，7例(30.4%)至少存在一種陽性自身抗體,，其中3例為ZnT8A(表1)。因此,，所有特異性自身抗體（GADA,、IA-2A、ZnT8A和IAA）聯(lián)合檢測的陽性預測值明顯高于ICA-IIF檢測,，加測ZnT8A時可進一步提高陽性預測值。

討論

這項意大利的大型多中心回顧性研究證實,，在兒童T1DM的實驗室診斷過程中引入ZnT8A檢測具有重要的提高作用,。在該兒童T1DM隊列研究中，ZnT8A檢測在新發(fā)患者中的靈敏度(61.1%)和特異性(97.3%)與先前的研究一致[9,17,18],，并且與其他已知的主要糖尿病自身抗體具有可比性,，這證實了該檢測的分析可靠性和臨床實用性。

ZnT8A的檢出率在病程4年內保持基本穩(wěn)定隨后出現(xiàn)顯著下降,，但在病程≥5年的患者中,，ZnT8A的檢出率仍有34%,，這一現(xiàn)象與另一個高加索隊列的T1DM兒童一致[17]。ZnT8A在新發(fā)病時顯示出與GADA相同的檢出率,，略高于IA-2A,，但只有GADA在很長的隨訪中顯示出高持久性。在本研究中,，ZnT8A在幼兒中的檢出率往往高于青少年,，但未發(fā)現(xiàn)統(tǒng)計學差異。

本研究證實了ZnT8A是糖尿病自身免疫的可靠標志物,，無論是獨立篩查指標,、還是與其他自身抗體聯(lián)合應用，均提高了實驗室檢測的總體診斷性能和陽性預測值,?？紤]到ICA-IIF和IAA的檢測存在一些技術局限性，并且沒有顯示出對診斷過程有價值的影響,，ZnT8A作為目前T1DM生物分析的補充評估顯得更加重要,。

值得注意的是，在本研究中,，沒有一例ICA和IAA單陽的新發(fā)T1DM患者,。因此，當引入ZnT8A作為當前生物標志物的補充時,，血清學測試的總體診斷性能顯著提高,，可能在不失去靈敏度的情況下可排除ICA和IAA檢測。

本研究目前的數(shù)據(jù)支持GADA,、IA-2A和ZnT8A的組合是目前兒童T1DM患者有效和具成本效益的診斷方法,。

參考文獻：Fabris M, Zago S, Liguori M, et al. Anti-zinc transporter protein 8 autoantibodies significantly improve the diagnostic approach to type 1 diabetes: an Italian multicentre study on paediatric patients[J]. Autoimmunity Highlights, 2015, 6(1): 17-22.