一、儲(chǔ)存條件

血清一般儲(chǔ)存于-20℃,，同時(shí)應(yīng)避免反復(fù)凍融,。若存放于4℃時(shí),，請(qǐng)勿超過(guò)一個(gè)月,。

二、血清中絮狀沉淀的處理

沉淀包含纖維蛋白和脂蛋白,，這是正常特性,，不會(huì)影響產(chǎn)品性質(zhì)。

離心血清(400g,，1-2分鐘)或簡(jiǎn)單的讓其沉淀在瓶子底部,，將血清小心的轉(zhuǎn)移到另一個(gè)無(wú)菌瓶里。

大多情況輕輕搖動(dòng)沉淀并加熱至37℃就會(huì)再溶解,。

一般不建議采用過(guò)濾的方法除去沉淀,，因?yàn)槌恋頃?huì)堵塞濾膜而無(wú)法過(guò)濾。

三,、使用濃度

一般為5-20%,，常用是10%。過(guò)多血清容易使培養(yǎng)中的細(xì)胞發(fā)生變化,，特別是一些二倍體的無(wú)限細(xì)胞系,，迅速生長(zhǎng)之后容易發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化。

四,、解凍方法

血清從冰箱取出后應(yīng)慢慢地解凍,。zh在4℃低溫冰箱里放置一天或直到*融化為止。如果時(shí)間不允許低溫解凍, 可參考以下解凍方法：

1. 將血清從冰箱里取出后,，在室溫下放置15-20分鐘,。

2. 然后將血清放置在37℃水浴槽里。過(guò)高溫度會(huì)導(dǎo)致血清出現(xiàn)渾濁現(xiàn)象,。不要讓水淹沒(méi)裝有血清的瓶子,。

3. 每隔5分鐘左右適當(dāng)搖晃瓶子,，直到*地解凍為止。

五,、熱滅活方法

加熱可以滅活補(bǔ)體系統(tǒng),。激活的補(bǔ)體參與溶解細(xì)胞事件，刺激平滑肌收縮,，細(xì)胞和血小板釋放組胺,，激活淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。在免疫學(xué)研究,，培養(yǎng)ES細(xì)胞,、平滑肌細(xì)胞時(shí)，推薦使用熱滅活血清,。若必須做血清的熱滅活,，請(qǐng)遵守56℃，30分鐘的原則,，并且隨時(shí)搖晃均勻,。血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要,，可以無(wú)須做此步驟,。

1. 用上述描述的方法將血清在低溫冰箱或室溫下解凍。

2. 在血清解凍時(shí),，將一個(gè)容器裝入適量的水,，用于模擬裝有血清瓶子在熱處理過(guò)程中檢測(cè)瓶?jī)?nèi)水的溫度。容器大小,、質(zhì)地和裝水的量zh與裝血清的瓶子相同或相似,。

3. 待血清*解凍時(shí)，將含有血清的瓶子放在預(yù)熱的56℃水浴里,，不要將含有血清的瓶子讓水淹沒(méi)或接近瓶子的蓋子,，以免導(dǎo)致污染。

4. 在開始加熱處理時(shí),，要及時(shí)使用溫度計(jì)測(cè)定模擬瓶?jī)?nèi)水的溫度,。

5. 在預(yù)熱期間，每隔3-5分鐘要適當(dāng)搖晃含有血清和水的瓶子,，確保瓶?jī)?nèi)液體均勻加熱,。

6. 一旦模擬瓶?jī)?nèi)的水溫達(dá)到55.8±0.5℃時(shí)，開始計(jì)時(shí),，并在此溫度范圍內(nèi)熱處理30分鐘,，然后立即放在冰上冷卻。

為防止在熱處理過(guò)程中由蛋白質(zhì)變性而導(dǎo)致的渾濁和沉淀現(xiàn)象,，熱處理時(shí)應(yīng)注意下列事項(xiàng)：

1. 不要用高于25℃以上的溫度加快解凍速度,。

2. 在熱處理之前,，要使血清*融解。

3. 不要使熱處理的溫度高于56.3℃

4. 熱處理時(shí)間不要長(zhǎng)于30分鐘,。

5. 在加熱過(guò)程中一定要定時(shí)搖動(dòng)血清,。

六、避免事項(xiàng)

1.避免反復(fù)凍融

長(zhǎng)時(shí)間儲(chǔ)存在2-8℃時(shí),，血清中的各種蛋白和脂蛋白可能聚集而形成沉淀或可見的混濁,。

2.避免產(chǎn)生沉淀

解凍血清時(shí)，請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻,，使溫度及成分均一,，減少沉淀的發(fā)生。

血清分裝時(shí),，須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),，使溫度與成分均一。

勿直接由-20℃直接至37℃解凍,，因溫度改變太大,，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。

勿將血清置于37℃太久,，否則血清會(huì)變得渾濁,，同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成份也會(huì)因此受到破壞，從而影響血清的品質(zhì),。

七、建議事項(xiàng)

一旦您在新鮮培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素時(shí),，您應(yīng)該在兩到三周內(nèi)使用它,。因?yàn)橐恍┛股睾脱逯械幕境煞衷诮鈨龊缶烷_始降解。(100U/mL青霉素,；100µg/mL鏈霉素)