色譜填料的選擇

來源：北京綠百草科技發(fā)展有限公司 2023年11月25日 11:32

　　一,、硅膠基質(zhì)填料

　　1,、正相色譜

　　正相色譜用的固定相通常為硅膠(Silica)以及其它具有極性官能團(tuán)，如胺基團(tuán)(NH2,，APS)和氰基團(tuán)(CN,，CPS)的鍵合相填料。

　　由于硅膠表面的硅羥基(SiOH)或其它極性基團(tuán)極性較強(qiáng),，因此,，分離的次序是依據(jù)樣品中各組份的極性大小，即極性較弱的組份最先被沖洗出色譜柱,。

　　正相色譜使用的流動相極性相對比固定相低,，如：正己烷(Hexane)、氯仿(Chloroform),、二氯甲烷(Methylene Chloride)等,。

　　2、反相色譜

　　反相色譜用的填料常是以硅膠為基質(zhì),，表面鍵合有極性相對較弱的官能團(tuán)的鍵合相,。反相色譜所使用的流動相極性較強(qiáng)，通常為水,、緩沖液與甲醇,、乙腈等的混合物。

　　樣品流出色譜柱的順序是極性較強(qiáng)的組份最先被沖洗出,，而極性弱的組份會在色譜柱上有更強(qiáng)的保留,。

　　常用的反相填料有：C18(ODS)、C8(MOS),、C4(Butyl),、C6H5(Phenyl)等。

　　二,、聚合物填料

　　聚合物填料多為聚苯乙烯-二乙烯基苯或聚甲基丙烯酸酯等,，其主要優(yōu)點(diǎn)是在pH值為1～14均可使用。

　　相對于硅膠基質(zhì)的C18填料,，這類填料具有更強(qiáng)的疏水性;大孔的聚合物填料對蛋白質(zhì)等樣品的分離非常有效,。

　　現(xiàn)有的聚合物填料的缺點(diǎn)是相對硅膠基質(zhì)填料，色譜柱柱效較低,。

　　三,、其它無機(jī)填料

　　其它HPLC的無機(jī)填料色譜柱也已經(jīng)商品化,。由于其特殊的性質(zhì)，一般僅限于特殊的用途,。如,，石墨化碳正逐漸成為反相色譜柱填料。這種填料的分離不同于硅膠基質(zhì)烷基鍵合相,，石墨化碳的表面即是保留的基礎(chǔ),，不再需其它的表面改性。

　　該柱填料一般比烷基鍵合硅膠或多孔聚合物填料的保留能力更強(qiáng),。石墨化碳可用于分離某些幾何異構(gòu)體,，又由于在HPLC流動相中不會被溶解，這類柱可在任何pH與溫度下使用,。

　　氧化鋁也可用于HPLC,，氧化鋁微粒剛性強(qiáng)，可制成穩(wěn)定的色譜柱柱床,，其優(yōu)點(diǎn)是可在pH高達(dá)12的流動相中使用,。

　　但由于氧化鋁與堿性化合物作用也很強(qiáng)，應(yīng)用范圍受到一定的限制,，所以未能廣泛應(yīng)用,。新型氧化鋯基質(zhì)色譜填料也可用于HPLC，商品化的僅有聚合物涂層的多孔氧化鋯微球色譜柱,，應(yīng)用pH范圍1～14,，溫度可達(dá)100℃。

　　由于氧化鋯填料是最近幾年才開始研究,，加之面臨的實(shí)驗(yàn)難度,，其重要用途與優(yōu)勢尚在進(jìn)行中。

相關(guān)產(chǎn)品

凡本網(wǎng)注明“來源：化工儀器網(wǎng)”的所有作品,，均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品,，未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品,。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的,，應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用，并注明“來源：化工儀器網(wǎng)”,。違反上述聲明者,，本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源（非化工儀器網(wǎng)）的作品,，目的在于傳遞更多信息,，并不代表本網(wǎng)贊同其觀點(diǎn)和對其真實(shí)性負(fù)責(zé)，不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任,。其他媒體,、網(wǎng)站或個(gè)人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時(shí),，必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源，并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任,。
如涉及作品內(nèi)容,、版權(quán)等問題，請?jiān)谧髌钒l(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系,，否則視為放棄相關(guān)權(quán)利,。

聯(lián)系我們