工藝開發(fā)和生產(chǎn)中,，生物反應(yīng)器或其他細(xì)胞培養(yǎng)工具中重要的培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)成分和細(xì)胞代謝物需要在一些關(guān)鍵時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行監(jiān)測(cè)。REBEL是一個(gè)高度集成的分析儀,，它能夠以很小的樣本量,、快速的分析時(shí)間，幫助加快工藝開發(fā)策略的優(yōu)化,。REBEL僅需對(duì)樣品進(jìn)行離心或過(guò)濾后稀釋,，這比傳統(tǒng)LC或LC-MS方法要簡(jiǎn)單得多,，分析時(shí)間也更短。

一,、CHO細(xì)胞培養(yǎng)基分析

CHO細(xì)胞CDM培養(yǎng)基通常有兩種形式：液體和干粉,。當(dāng)決定使用哪種培養(yǎng)基類型時(shí)，研究人員必須了解項(xiàng)目所需的培養(yǎng)基數(shù)量,。液體培養(yǎng)基可以直接用于小型生物反應(yīng)器,、搖瓶和微孔板。而干粉必須經(jīng)過(guò)配制,，但干粉的運(yùn)輸和儲(chǔ)存通常更容易也更便宜,，所以干粉培養(yǎng)基通常用于更大的培養(yǎng)體積。許多公司都有專門的培養(yǎng)基配制人員和實(shí)驗(yàn)室來(lái)配制干粉培養(yǎng)基,，以簡(jiǎn)化細(xì)胞培養(yǎng)和上游流程開發(fā)的工作流程,。在補(bǔ)料之前快速地分析新鮮培養(yǎng)基的成分，可以確保培養(yǎng)基成分在放大或配制前后的培養(yǎng)基成分的一致性,。

以上報(bào)告的濃度來(lái)自于對(duì)干粉和液體的CDM培養(yǎng)基配方的分析（兩種培養(yǎng)基混合物都沒(méi)有谷氨酰胺）,。對(duì)于干粉，按照制造商的說(shuō)明來(lái)制備,。樣品都用REBEL稀釋劑稀釋10倍,，報(bào)告的濃度為5次重復(fù)試驗(yàn)的平均值。

二,、含血清和其他添加劑的培養(yǎng)基分析

CDM培養(yǎng)基的成分分析可能會(huì)因為血清（FBS）和其他添加劑的存在而變得復(fù)雜,。圖中，CDM培養(yǎng)基中的成分濃度不受胎牛血清存在的影響（0-25 %,，圖左）,。在第二個(gè)實(shí)驗(yàn)中（圖右），CDM培養(yǎng)基中報(bào)告的成分濃度同樣不受其他幾種不同添加劑的影響,。而這樣的結(jié)果,，對(duì)于REBEL而言，只需用稀釋液將樣品離心或過(guò)濾后稀釋100倍,，不需要額外的任何樣品準(zhǔn)備工作,。

三、T細(xì)胞培養(yǎng)基分析

隨著更多的無(wú)動(dòng)物源,、商業(yè)培養(yǎng)基的引入，了解T細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中需要補(bǔ)料哪些組分很重要,，可以更容易地確保生產(chǎn)工藝的一致性,。采用REBEL檢測(cè)RPMI +血清、有無(wú)添加血清的combo (基礎(chǔ)及細(xì)胞擴(kuò)增版本),、單獨(dú)的基礎(chǔ)培養(yǎng)基和單獨(dú)的細(xì)胞擴(kuò)增培養(yǎng)基的必需氨基酸含量,。

四,、HEK293 CDM培養(yǎng)基分析

對(duì)來(lái)自四家供應(yīng)商的HEK293培養(yǎng)基進(jìn)行了測(cè)試，以確定針對(duì)同種細(xì)胞的不同培養(yǎng)基配方之間的差異,。分析前將培養(yǎng)基稀釋100倍（n = 5）,。總的來(lái)說(shuō),，來(lái)自供應(yīng)商3的培養(yǎng)基中幾種成分的濃度最高,。

五、間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基分析

測(cè)試了兩種不同的間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基與補(bǔ)液,。分析前將培養(yǎng)基稀釋10倍（n = 5）,。當(dāng)添加補(bǔ)液時(shí)，培養(yǎng)基1的氨基酸水平?jīng)]有差異,，但在培養(yǎng)基2中,，Gly、Ile,、Phe,、Pro、Ser,、 Thr,,、Trp和Val的濃度大幅增加。

使用方法和樣品處理：

你所看到的就是你所得到的,。

REBEL側(cè)面不需要外部計(jì)算機(jī),、壓縮氣瓶、廢物或者試劑瓶,。

您需要做的只是,，取品(1)后離心或過(guò)濾以除去細(xì)胞，并用REBEL稀釋液(2)稀釋,。然后將樣品載入設(shè)備(3),，按“start”(4)。所有的校準(zhǔn)劑和試劑都放在REBEL儀器內(nèi)部,，數(shù)據(jù)將被自動(dòng)處理成報(bào)告（CSV或PDF）,，可用U盤導(dǎo)出(5)。

研究人員不僅需要確保他們所使用的細(xì)胞培養(yǎng)基適合他們的應(yīng)用,，同時(shí)也應(yīng)考慮在運(yùn)輸過(guò)程,、在儲(chǔ)存期間和培養(yǎng)過(guò)程中頻繁分析其中成分濃度的變化，以確保細(xì)胞生長(zhǎng)和生產(chǎn)方面的任何變化都不是由細(xì)胞培養(yǎng)基配方/成分濃度的未知變化而產(chǎn)生的,。而REBEL將會(huì)是做這些的得力助手,。