苦味、酸味,、水果味,、焦糖味,、花香……啤酒因風(fēng)味多樣得到廣大消費者的喜愛。
精釀啤酒是以麥芽,、啤酒花,、酵母,、某些天然添加物及水為原料,,在釀造過程中,,不添加與調(diào)整風(fēng)味無關(guān)的物質(zhì),按傳統(tǒng)工藝在小型啤酒生產(chǎn)線內(nèi)經(jīng)低溫發(fā)酵生產(chǎn)的具有各種風(fēng)味與濃郁口感的一類啤酒,。
風(fēng)味是衡量啤酒品質(zhì)的重要因素,,其對啤酒的風(fēng)格、口感起決定性作用,。精釀啤酒經(jīng)過低溫發(fā)酵后會產(chǎn)生醇類,、酯類、羰基類,、有機(jī)酸類,、硫化物等上千種風(fēng)味物質(zhì)。
采用HS-GC-IMS對不同來源及類型的精釀啤酒中揮發(fā)性組分進(jìn)行分析, 通過指紋圖譜比較揮發(fā)性組分差異, 結(jié)合主成分分析可實現(xiàn)不同類型精釀啤酒區(qū)分,。
1 方案與分析
研究選用德國產(chǎn)白啤酒 Y,、德國產(chǎn)白啤酒、德國產(chǎn)黃啤酒,、德國產(chǎn)黑啤酒,、自制白啤酒、自制黃啤酒,、自制IPA啤酒、自制玫瑰啤酒,,采用氣相色譜-離子遷移譜聯(lián)用儀等儀器進(jìn)行檢測分析,。
1. 啤酒樣品的 GC-IMS 譜圖分
圖1為8個精釀啤酒樣品的GC-IMS偽色圖,。相對遷移時間1.0處的紅色垂直豎線為反應(yīng)離子峰,實際遷移時間為 8ms,,經(jīng)歸一化處理。
圖1中的每一個點即代表所檢測到的一種物質(zhì),,顏色的深淺代表信號的強弱, 顏色越紅表示濃度越高,顏色越淺表示濃度越低,,整個譜圖上的點即構(gòu)成了樣品中所檢測到的所有揮發(fā)性組分,。
從圖1中可以明顯看出,4種自制精釀啤酒中的揮發(fā)性物質(zhì)濃度要高于4種德國精釀啤酒。
圖1 8 個精釀啤酒樣品的 GC-IMS 偽色圖
2. 精釀啤酒樣品揮發(fā)性組分定性分析
為了更好地了解各精釀啤酒的風(fēng)味差異,,需對譜圖中的特征物質(zhì)進(jìn)行定性分析,。譜圖中共計鑒定出 63個峰,,去除單體,、二聚體重復(fù),共有 54 種揮發(fā)性香氣成分,,包含酯類24種,、醇類9種、醛類9種,、酮類6種,、萜類3種、酸類2種,、醚類1種等,。
其中,酯類香氣成分最為豐富,,為啤酒提供香甜水果及花香的呈味輪廓,。而酒體中含有的多種高級醇賦予了啤酒獨特的果香和辛辣味,如 4-松油醇,、3-甲基-1-丁醇等,。酯類和醇類是構(gòu)成啤酒香氣風(fēng)格的重要組分,它們之間的濃度平衡會影響啤酒總體香氣分布,。
3. 精釀啤酒樣品中揮發(fā)性組分指紋圖譜比較
為了更直觀地對比8個啤酒樣品中揮發(fā)性組分的差異,,選取譜圖中的特征化合物,由儀器配套的VOCal軟件中的Gallery Plot插件制作8個樣品的指紋圖譜,,見圖 2,。
圖2 精釀啤酒樣品中揮發(fā)性組分的指紋圖譜
指紋圖譜清晰地展示了各個啤酒樣品中揮發(fā)性香氣成分的差異。整體來看,,4種德國啤酒中的揮發(fā)性組分差異不大,,且含量偏低,而自制的4種啤酒中的風(fēng)味物質(zhì)差異顯著,,具有各自的特征風(fēng)味物質(zhì)成分,。3-甲基-1-丁醇、2-甲基-1-丙醇,、乙醇,、乙酸乙酯等物質(zhì)在所有樣品中的含量都很高,只有 IPA 啤酒稍低一些,。
德國黃啤酒中乙酸,、乙酸異丁酯等物質(zhì)的含量較高,;德國黑啤酒中乙酸庚酯等物質(zhì)的含量較高,;
自制白啤酒中的 4-松油醇,、香茅醛、2-庚酮,、2,3-戊二酮,、戊醛、癸酸乙酯,、乙酸甲酯,、乙酸丙酯,、丙酸乙酯,、丁酸乙酯、辛酸乙酯等物質(zhì)的含量較高(A 區(qū)域),,這些物質(zhì)可為精釀啤酒提供多重復(fù)合水果及奶油,、焦糖、花香,、酒香,、香草等風(fēng)味;
自制黃啤酒中的丙酸,、己醛,、順式-3-己烯醇等物質(zhì)的含量較高(B 區(qū)域),可為該產(chǎn)品提供多青草,、濃草及蘋果香等風(fēng)味,;
自制 IPA 啤酒中的丙酮、6-甲基-5-庚烯-2-酮,、丙醛,、1-己醇、2-甲基丙醛,、3-甲基丁醛,、壬醛、檸檬烯,、α-水芹烯,、丁酸戊酯、異丁酸乙酯,、庚酸乙酯,、異丁酸異丁酯、異丁酸-2-甲基丁酯,、反式-2-己烯酸乙酯,、戊酸乙酯等物質(zhì)的含量較高(C 區(qū)域), 為該產(chǎn)品提供柑橘香,、奶油、玫瑰,、黑胡椒,、藹荷等風(fēng)味;
自制玫瑰啤酒中的 1-丙醇,、1 -戊醇,、1 -丁醇、3 -羥基-2-丁酮,、1 -羥基-2-丙酮,、3-甲基丁醛、異松油烯,、辛酸乙酯,、乙酸己酯、己酸乙酯,、乙酸異戊酯,、丁酸乙酯、丁酸異丁酯,、甲酸乙酯,、3-甲基丁酸乙酯、2-甲基丁酸乙酯,、壬酸乙酯等物質(zhì)的含量較高(D 區(qū)域),,可為該產(chǎn)品提供蘋果、梨,、香蕉等水果香氣及酒香,、玫瑰等風(fēng)味。
但需注意的是,,同一物質(zhì)在不同濃度下散發(fā)出的香氣會有所不同,,各個風(fēng)味物質(zhì)協(xié)調(diào)作用才能共同構(gòu)成了該啤酒樣品的香氣類型。
4. 主成分分析
PCA 可以簡化實驗數(shù)據(jù),,并通過確定幾個主成分因子來代表原始樣本中許多復(fù)雜且難以找到的變量,,然后根據(jù)不同樣本中主成分因子的貢獻(xiàn)率來評估樣本之間的規(guī)律性和差異。
利用所檢測的所有揮發(fā)性組分的峰強度進(jìn)行 PCA, 以考察不同類型啤酒樣品的聚類效果,。分析結(jié)果見圖 3,。
圖3 不同類型精釀啤酒啤酒樣品的 PCA 圖
由圖 3 可以看出,PC_1 和PC_2的方差貢獻(xiàn)率分別為50%和 20%,,累積方差貢獻(xiàn)率為 70%,,表明 PCA 結(jié)果能解釋總變異的 70%,具有很好的代表性,。
德國白啤酒 Y,、德國白啤酒,、德國黃啤酒3個樣品分布較近, 說明3者組分差異較小,;在 PC_1 方向上, 德國黑啤酒,、自產(chǎn)黃啤酒、自產(chǎn)白啤酒,、自產(chǎn)玫瑰啤酒之間可以很好地區(qū)分,;在 PC_2方向上可將自產(chǎn) IPA 啤酒區(qū)和自產(chǎn)玫瑰啤酒分開來,。
2 結(jié)論
本研究利用HS-GC-IMS鑒定了不同類型啤酒中的揮發(fā)性香氣組分,,檢測出54種揮發(fā)性香氣成分,采用指紋圖譜直觀展示出各個樣品中揮發(fā)性組分的差異,,結(jié)果顯示不同類型的啤酒中揮發(fā)性香氣成分含量存在很大差異,。
自制的4種啤酒中風(fēng)味物質(zhì)具有各自的特征風(fēng)味物質(zhì)成分,如自制白啤中的香茅醛,、2-庚酮,、癸酸乙酯, 自制黃啤中的己醛,自制印度淡色艾爾啤酒中的異丁酸異丁酯,、異丁酸-2-甲基丁酯,、壬醛、α-水芹烯, 自制玫瑰啤酒中的乙酸己酯,、壬酸乙酯,、2-甲基丁酸乙酯、3-甲基丁酸乙酯等,。
酒精發(fā)酵過程中,,酵母菌會產(chǎn)生一系列酒精發(fā)酵副產(chǎn)物,其中酯類物質(zhì)是影響啤酒風(fēng)味的主要成分之一,,它們具有近似水果的香氣,,如蘋果香、香蕉香,、菠蘿香,、花香等。
相關(guān)研究已經(jīng)證實,,具有較高 β-葡萄糖苷酶活性的酵母菌經(jīng)過發(fā)酵后會使精釀啤酒中葡萄糖苷結(jié)合萜類及酯類物質(zhì)明顯增加,,產(chǎn)生獨特的花香和果味特征。
本研究中發(fā)現(xiàn)自制精釀啤酒中癸酸乙酯,、辛酸乙酯,、己酸乙酯、戊酸乙酯,、丁酸乙酯等風(fēng)味物質(zhì)含量均顯著超過德國產(chǎn)啤酒,,表明自制精釀啤酒的果香與酒香更濃郁,,這可能與生產(chǎn)中使用了自制產(chǎn)香酵母(較高 β-葡萄糖苷酶活性)與釀酒酵母共同作用,參與部分代謝環(huán)節(jié)或是和啤酒原有的某些物質(zhì)發(fā)生化學(xué)反應(yīng)如酯化反應(yīng),、羥基化反應(yīng)等有關(guān),。
綜上,HS-GC-IMS結(jié)合多元統(tǒng)計學(xué)方法可有效實現(xiàn)不同風(fēng)味啤酒的有效區(qū)分,。
相關(guān)產(chǎn)品
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