前言

丙酸氯倍他索是一種抗炎皮質(zhì)類固醇,，屬于糖皮質(zhì)激素中的一種,，具有較強的抗炎、抗瘙癢和毛細管收縮作用,，因此很多三無化妝品可能會違規(guī)添加糖皮質(zhì)激素,，使用初期由于強大的抗炎功能，使皮膚呈現(xiàn)出一種光滑潔白吹彈可破的狀態(tài),，但長時間使用,，就開始出現(xiàn)紅血絲、爆痘,，皮膚敏感等問題,，繼續(xù)使用會使皮膚情況越來越糟糕，停用皮膚情況更糟糕,，最終只能求醫(yī)慢慢來調(diào)整,。

本文參照《GB/T 24800.2-2009 化妝品中四十一種糖皮質(zhì)激素的測定》，利用EZsep™HLB固相萃取柱（60mg/3mL,，貨號：PZ12602）對化妝品樣品進行凈化,，再通過高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀進行檢測，建立了化妝品中丙酸氯倍他索的檢測方法,，此方法的回收率及平行性良好,，適合化妝品中丙酸氯倍他索的檢測。

1、實驗過程

1.1 儀器與試劑  

SPE1000 全自動固相萃取系統(tǒng),，北京萊伯泰科儀器股份有限公司；

4500質(zhì)譜系統(tǒng),，SCIEX公司,；

E.T.氮吹濃縮儀，貨號：C020017,，北京萊伯帕茲檢測科技有限公司,；

EZsep™HLB固相萃取柱（60mg/3mL，貨號：PZ12602）,，北京萊伯帕茲檢測科技有限公司,；

離心機，H1850,，湖南湘儀實驗室儀器開發(fā)有限公司,；

乙腈（色譜純），購自賽默飛世爾科技（中國）有限公司,；

甲醇（色譜純）,，購自賽默飛世爾科技（中國）有限公司。

1.2 工作液配制

丙酸氯倍他索標準儲備液：100ug/mL,，溶劑為甲醇,，購自壇墨質(zhì)檢標準物質(zhì)中心；

丙酸氯倍他索標準工作液：取100μL的標準儲備液于10mL的容量瓶中,，用40%乙腈水溶液定容,，得到濃度為1.0μg/mL的標樣工作液；

移取1.0μg/mL的苯并（a）芘標準工作液0.05,、0.1,、0.2、0.4,、0.8mL,，分別置于1mL容量瓶中，用40%乙腈水溶液定容至刻度,，得到濃度為0.05,、0.1、0.2,、0.4,、0.8、1.0μg/mL的標準曲線,。

1.3 實驗部分

1.3.1 樣品制備

準確稱取化妝品樣品0.2g（精確至0.01g）于15mL塑料離心管中,，加入3mL飽和氯化鈉溶液，渦旋混勻使樣品分散，準確加入2mL乙腈,，充分渦旋提取2min,，5000r/min離心10min，吸出上層清液于50mL離心管中,，下層氯化鈉溶液用2mL乙腈重復提取1次,，合并2次乙腈提取液，在提取液中準確加入40mL高純水,，混勻,，加入亞鐵氰化鉀溶液0.2mL，混勻,，加入乙酸鋅溶液0.2mL,，混勻，5000r/min離心10min,，轉(zhuǎn)移出上清液待凈化,。

1.3.2 固相萃取凈化

EZsep™HLB固相萃取柱（60mg/3mL，貨號：PZ12602）依次用5mL甲醇,、10mL水活化,，取1.3.1待凈化液上樣，上樣結(jié)束后用6mL10%乙腈水溶液淋洗萃取柱,，再用4mL甲醇洗脫萃取柱,，收集全部洗脫液，然后于E.T.氮吹濃縮儀（貨號：C020017）40℃下氮氣吹干,，準確吸取4mL水渦旋復溶0.5min,，過微孔濾膜后供LC-MS/MS測定。

1.3.3 LC-MS/MS儀器條件

色譜柱：Shim-pack Velox C18（2.7μm,，2.1*100mm）,；

檢測方式：多反應監(jiān)測（MRM）；

流動相：A:0.1%乙酸水,，B:0.1%乙酸乙腈（梯度洗脫程序見表1）,；

流速：0.3mL/min；

進樣量：1μL,。

表1 梯度洗脫程序

2,、實驗結(jié)果

2.1 加標回收率結(jié)果

表2 加標回收率結(jié)果

2.2 加液色譜圖

圖1 標液色譜圖

2.3 加標樣品色譜圖

圖2 加標樣品色譜圖

3、結(jié)論

本次實驗展示了使用EZsep™HLB固相萃取柱（60mg/3mL,，貨號：PZ12602）對化妝品中丙酸氯倍他索進行凈化,，通過高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀進行測定，該方法的加標回收率在77.8%~83.3%之間,，RSD為2.6%,，能夠滿足標準要求,。說明EZsep™HLB固相萃取柱（60mg/3mL，貨號：PZ12602）能很好的完成方法中的凈化工作,，并且結(jié)果穩(wěn)定,、可靠。

4,、參考文獻

《GB/T 24800.2-2009 化妝品中四十一種糖皮質(zhì)激素的測定》