凱氏定氮儀的原理　　
      蛋白質(zhì)是含氮的有機(jī)化合物。食品與硫酸和催化劑一同加熱消化,，使蛋白質(zhì)分解,，分解的氨與硫酸結(jié)合生成硫酸銨。然后堿化蒸餾使氨游離,，用硼酸吸收后再以硫酸或鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定,，根據(jù)酸的消耗量乘以換算系數(shù)，即為蛋白質(zhì)含量,。
　   1.有機(jī)物中的胺根在強(qiáng)熱和CuSO4，濃H2SO4 作用下,，硝化生成（NH4）2SO4
　　反應(yīng)式為：
　　2NH2+H2S04+2H＝（NH4）2S04 （其中CuSO4做催化劑）
　　2.在凱氏定氮器中與堿作用,，通過蒸餾釋放出NH3 ，收集于H3BO3 溶液中
　　反應(yīng)式為：
　?。∟H4）2SO4+2NaOH＝2NH3+2H2O+Na2SO4
　　2NH3+4H3BO3＝（NH4）2B4O7+5H2O
　　3. 用已知濃度的H2SO4（或HCI）標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定,，根據(jù)HCI消耗的量計算出氮的含量，然后乘以相應(yīng)的換算因子,，既得蛋白質(zhì)的含量
　　反應(yīng)式為：
　?。∟H4）2B4O7+H2SO4+5H2O＝（NH4）2SO4+4H3BO3
　?。∟H4）2B4O7+2HCl+5H2O＝2NH4Cl+4H3BO3

凱氏定氮儀的作用　　
     凱氏定氮儀用凱氏方法檢測谷物、食品,、飼料,、水、土壤,、淤泥,、沉淀物和化學(xué)品中的氨、蛋白質(zhì)氮含量,、酚,、揮發(fā)性脂肪酸、氰化物,、二氧化硫,、乙醇等含量。具有相當(dāng)好的性價比,，僅僅滴定過程需要人工操作一下,，非常適合實(shí)驗室及檢驗機(jī)構(gòu)常規(guī)檢測。廣泛用于食品,、農(nóng)作物,、種子、土壤,、肥料等樣品的含氮量或蛋白質(zhì)含量分析,。

凱氏定氮儀的操作方法　　
消化
      根據(jù)樣品量的多少選擇適宜的凱氏燒瓶4個（此處以50毫升為例），其中2個為對照,。向燒瓶內(nèi)加入準(zhǔn)確稱量的樣品，注意要把樣品加至燒瓶底部,，切勿沾在瓶口及瓶頸上,。另外2個作空白對照，好對樣品進(jìn)行校正,。
　　在每個燒瓶中加入約300毫克硫酸鉀-硫酸銅混合物（硫酸鉀：五水硫酸銅=3：1,、6：1或10：1均可），再用量筒加入3毫升濃硫酸,。將上述4個凱氏燒瓶放在通風(fēng)良好處（在通風(fēng)櫥中進(jìn)行）加熱消化,。先用小火加熱至沸騰,。此時會產(chǎn)生大量泡沫,，應(yīng)特別注意不能讓黑色物質(zhì)上升到燒瓶頸部,，否則將嚴(yán)重影響分析結(jié)果。當(dāng)混合物停止冒泡,，蒸汽與二氧化硫也均勻地放出時,，將火焰調(diào)節(jié)到保持瓶內(nèi)液體微微沸騰,。假若發(fā)現(xiàn)瓶頸上有黑色顆粒,，應(yīng)小心地將燒瓶傾斜振搖，用消化液將其洗下,。在消化過程中要時常轉(zhuǎn)動燒瓶,，使全部樣品都浸在消化液中。當(dāng)消化液呈清澈淡藍(lán)色時即告消化結(jié)束,。時間一般在5~6小時！若樣品中含賴氨酸或組氨酸較多時，消化時間需要延長1~2倍,。因為這兩種氨基酸中的氮在短時間內(nèi)不易消化*,。
蒸餾
采用改良式凱氏定氮儀。
　　1,、洗滌蒸餾儀：用硼酸指示劑（取100毫升2%硼酸溶液,，滴加混合指示劑約1毫升，搖勻后呈紫紅色即可,；混合指示劑：50毫升0.1%甲烯藍(lán)乙醇+200毫升0.1%甲基紅乙醇,，存于棕色瓶中）檢測是否清洗干凈,。干凈標(biāo)準(zhǔn)：指示劑不變色,。
　　2,、樣品和空白的蒸餾：取2毫升稀釋消化液至加樣口加入反應(yīng)室,，關(guān)閉加樣口,，另取1個裝硼酸指示劑的三角瓶接于冷凝管下端,。取30%氫氧化鈉（W/W）溶液約10毫升,，從加樣口緩慢加入,，當(dāng)未加完時關(guān)閉，并加入約3毫升蒸餾水,，再繼續(xù)緩慢加入一半后關(guān)閉，讓剩下的水作液封,。將加熱器重新放在蒸汽發(fā)生器下加熱（注：在清洗儀器完畢后應(yīng)拿走加熱器）,，待三角瓶中液體由紫紅變成鮮綠色起開始計時，蒸餾5分鐘,，然后移動三角瓶使液面離開冷凝管口約1厘米,，并用少量蒸餾水洗滌冷凝管口外周，繼續(xù)蒸餾1分鐘,?？瞻淄瑯印?br />　　3,、清洗儀器：同上，不*指示劑,。
　　滴定 用0.0100mol/L標(biāo)準(zhǔn)鹽酸（要標(biāo)定,，費(fèi)時）滴定三角瓶中收集的氨,，直至硼酸指示劑由綠變紫紅。