項(xiàng)目背景

作為農(nóng)業(yè)大國，我國對(duì)農(nóng)藥的使用歷史悠久、種類繁多。然而農(nóng)藥的使用給農(nóng)業(yè)帶來產(chǎn)量保證的同時(shí),，也由于把控不嚴(yán)，很容易產(chǎn)生濫用情況,。污染環(huán)境是其一,，更深層次的是容易使人誤食農(nóng)藥殘留超標(biāo)的農(nóng)產(chǎn)品，輕則對(duì)人身健康造成危害,，重則危及生命。

常見的農(nóng)藥主要包括有機(jī)磷類,、擬------除----蟲------菊-----酯-----類,、氨基甲酸酯類,、除草劑及其它水溶性農(nóng)藥。大量研究表明,，農(nóng)藥暴露與某些慢性疾病的發(fā)生率升高之間存在著聯(lián)系,，包括癌癥、帕金森病,、阿爾茨海默病,、多發(fā)性硬化癥、糖尿病,、心血管疾病,、慢性腎臟病及不育癥等。此外,，由于意外,、自----殺或故意犯-----罪而導(dǎo)致的急性農(nóng)藥中毒案例也時(shí)見報(bào)道。

由于毒物分析所面對(duì)的測(cè)定對(duì)象多為未知物,，并且含量較低,，同時(shí)檢測(cè)樣品多為血液、尿液,、組織及嘔吐物等復(fù)雜樣品,，因此研究和尋找適合多種化合物同時(shí)分析，具有一定通用性的快速分析篩選方法就成為急救醫(yī)學(xué)的重要研究?jī)?nèi)容之一,。

隨著質(zhì)譜技術(shù)的發(fā)展,，色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)（LC-MS/MS）由于具有靈敏度高、檢測(cè)范圍廣的特點(diǎn),，已成為較為成熟且被廣泛運(yùn)用,。

故根據(jù)臨床市場(chǎng)檢測(cè)需求，基于液質(zhì)平臺(tái)開發(fā)針對(duì)血液中常見數(shù)十種農(nóng)藥精準(zhǔn)篩查的方法,， 一方面可做到對(duì)農(nóng)藥中毒的定性診斷：對(duì)于一些患者診斷不明確,，需要與中毒鑒別診斷時(shí)，可以第一時(shí)間實(shí)現(xiàn)農(nóng)藥中毒的定性診斷,，為臨床醫(yī)生早期采取積極治療提供了客觀依據(jù),；

另一方面可做到對(duì)于農(nóng)藥中毒的定量檢測(cè)：對(duì)于診斷明確的中毒患者，體內(nèi)毒物的定量檢測(cè),，不僅可以評(píng)估患者的預(yù)后,，還可以指導(dǎo)制定最佳的毒物清除方案，如指導(dǎo)血液凈化清除相關(guān)毒物,，既能防止對(duì)患者的過度醫(yī)療,，浪費(fèi)患者的物力財(cái)力、又能避免治療不足,，增加患者的死亡風(fēng)險(xiǎn),。

 臨床報(bào)道案例

本研究結(jié)合實(shí)際中毒案例,，選取了常見的數(shù)十種農(nóng)藥( 詳見第三部分藥物種類) 。結(jié)合高效液相色譜 -串聯(lián)質(zhì)譜(LC-MS /MS) 技術(shù)進(jìn)行分析研究,，通過優(yōu)化前處理和分析條件,，建立了同時(shí)測(cè)定血液中農(nóng)藥的方法。該方法簡(jiǎn)單高效,，實(shí)現(xiàn)了一針進(jìn)樣同時(shí)對(duì)數(shù)十種農(nóng)藥進(jìn)行分析的目的,，對(duì)臨床和法醫(yī)毒物檢驗(yàn)工作具有重要意義。

儀器設(shè)備

型號(hào)：PreMed 5200 （浙械注淮20222220115）

標(biāo)準(zhǔn)品,、試劑

數(shù)十種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品（20mg/L）,、甲醇、甲酸銨,、甲酸為色譜級(jí),，檸檬酸鈉、檸檬酸氫二鈉,、氯化鈉,、乙酸鈉、無水硫酸鎂為分析純,，乙腈為色譜純,。

質(zhì)譜條件

監(jiān)測(cè)模式為多反應(yīng)監(jiān)測(cè)(MRM),，部分化合物監(jiān)測(cè)離子對(duì)、碰撞電壓(CE)等參數(shù)見下表,。

樣品前處理

詳見杭州譜聚醫(yī)療的毒物篩選檢測(cè)試劑說明書。

結(jié)果

• 典型圖譜,。數(shù)十種農(nóng)藥的MRM疊加色譜圖如下圖所示：

• 重復(fù)性,。經(jīng)過驗(yàn)證，測(cè)得農(nóng)藥及其代謝物的峰面積重復(fù)性RSD均小于10%,，滿足方法學(xué)驗(yàn)證要求,。

 結(jié)論

本項(xiàng)目建立了液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜同時(shí)測(cè)定血液中數(shù)十種農(nóng)藥的方法。該方法簡(jiǎn)便快速,、靈敏度高,、穩(wěn)定性好，滿足了實(shí)際工作中一針進(jìn)樣同時(shí)對(duì)數(shù)十種農(nóng)藥進(jìn)行定性定量分析的需求,，為臨床多農(nóng)藥的檢驗(yàn)鑒定提供了高效可靠的途徑,。

 藥物種類

 解決方案

檢測(cè)方法：液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（LC-MS/MS）。

專業(yè)高效的檢測(cè)流程：血樣采集——>高通量的樣本前處理方案——>上機(jī)檢測(cè)——>自動(dòng)審核數(shù)據(jù)及生成報(bào)告,。

儀器：超高效液相色譜儀（具體配有二元超高壓輸液泵,、超高壓自動(dòng)進(jìn)樣器、柱溫箱）,、PreMed 5200 液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜系統(tǒng),。

質(zhì)譜條件：使用APCI源，監(jiān)測(cè)模式為多反應(yīng)監(jiān)測(cè)(MRM),。為提高檢測(cè)靈敏度,，可根據(jù)保留時(shí)間分段監(jiān)測(cè)各化合物。

 關(guān)于譜聚

聚光科技生命科學(xué)板塊旗下譜聚醫(yī)療是一家醫(yī)療臨床質(zhì)譜產(chǎn)品服務(wù)平臺(tái),，聚焦于質(zhì)譜硬件及配套個(gè)性化定制,、臨床醫(yī)學(xué)樣本檢測(cè)體外診斷試劑盒產(chǎn)品及應(yīng)用技術(shù)、臨床科研合作等領(lǐng)域,，將竭誠為客戶提供集成化,、自動(dòng)化、標(biāo)準(zhǔn)化和流程化的臨床質(zhì)譜解決方案,，使客戶享受一站式的定制化服務(wù),。并致力于提供普惠大眾的臨床質(zhì)譜技術(shù)，推動(dòng)中國臨床質(zhì)譜深入發(fā)展和突破卡脖子關(guān)鍵難題,。

參考文獻(xiàn)：杜秋瑤,，張?jiān)品澹趵^芬,，超高效液相色譜 -串聯(lián)質(zhì)譜法同時(shí)測(cè)定血液中 115 種農(nóng)藥[J] 2020,39(4) : 485 ～ 491.