序言： 上轉(zhuǎn)換發(fā)光材料 (Upc o n v e rsi o n p h o s p h o rs material,UPM) 是一類(lèi)在長(zhǎng)波長(zhǎng)激發(fā)下發(fā)射短波長(zhǎng)光的材料,，其特點(diǎn)是所吸收 的光子能量低于發(fā)射的光子能量,。由于使用紅外光作為激發(fā)光源,，此類(lèi)材料 在防偽標(biāo)記,、激光探測(cè)和立體顯示上的用途已經(jīng)廣為人知,。最近幾年來(lái) , 科學(xué) 家們又發(fā)現(xiàn)上轉(zhuǎn)換發(fā)光材料有不易發(fā)生光漂白和發(fā)光強(qiáng)度高等優(yōu)點(diǎn) , 用在生物 標(biāo)記中可以大大提高檢測(cè)靈敏度和線(xiàn)性范圍,，因此上轉(zhuǎn)換發(fā)光材料的熒光發(fā) 射光譜是表征其性能的一個(gè)重要指標(biāo),，具有非常重要意義

與傳統(tǒng)典型的熒光發(fā)光過(guò)程（只涉及一個(gè)基態(tài)和一個(gè)激 發(fā)態(tài)）不同,，上轉(zhuǎn)換過(guò)程需要許多中間態(tài)來(lái)累積低頻的 激發(fā)光子的能量,。其中主要有三種發(fā)光機(jī)制：激發(fā)態(tài)吸 收、能量轉(zhuǎn)換過(guò)程,、光子雪崩,。這些過(guò)程均是通過(guò)摻雜 在晶體顆粒中的激活離子能級(jí)連續(xù)吸收一個(gè)或多個(gè)光子 來(lái)實(shí)現(xiàn)的，而那些具有 f 電子和 d 電子的激活離子因具 有大量的亞穩(wěn)能級(jí)而被用來(lái)上轉(zhuǎn)換發(fā)光,。然而高效率的 上轉(zhuǎn)換過(guò)程,，只能靠摻雜三價(jià)稀土離子實(shí)現(xiàn)，因其有較 長(zhǎng)的亞穩(wěn)能級(jí)壽命,。稀土離子的吸收和發(fā)射光譜主要來(lái) 自?xún)?nèi)層 4f 電子的躍遷,。在外圍 5s 和 5p 的電子的屏蔽下， 其 4f 電子幾乎不與基質(zhì)發(fā)生相互作用,，因此摻雜的稀土 離子的吸收和發(fā)射光譜與其自由離子相似,，顯示出極尖 銳的峰（半峰寬約 10-20nm）。而這同時(shí)就對(duì)外部激發(fā) 光源的波長(zhǎng)有了很大的限制,。激光熒光光譜技術(shù)用于化 學(xué)檢測(cè)領(lǐng)域具有信噪比高,、靈敏度好、檢測(cè)快速等優(yōu)點(diǎn),， 特別是對(duì)于上轉(zhuǎn)換材料的發(fā)光檢測(cè),。商業(yè)化的 980nm 激 光光源系統(tǒng)恰巧與它的吸收相匹配，為上轉(zhuǎn)換納米材料 提供了理想的激光激發(fā)光源,。

PerkinElmer 是世界上主要的熒光分光光度計(jì)生產(chǎn)商,， 也是技術(shù)上儀器供應(yīng)商,。PerkinElmer 公司 是采用脈沖氙燈做光源，具有熒光,、磷光和化學(xué)發(fā) 光三種測(cè)量模式,，在磷光和化學(xué)發(fā)光模式下，儀器內(nèi)部 激發(fā)光源自動(dòng)關(guān)閉,，這樣就為 980nm 激光光源的使用 提供了便利的條件,，也為上轉(zhuǎn)換納米材料的熒光發(fā)光測(cè) 試提供了硬件基礎(chǔ)，而其它廠(chǎng)家大多數(shù)使用傳統(tǒng)的連續(xù) 氙燈,，不能通過(guò)軟件將其關(guān)閉,，在使用激光光源時(shí)，只 能通過(guò)遮擋的方式將出光孔堵??；PerkinElmer 公司采 用脈沖氙燈光源，就可以很好的在內(nèi)部光源與外部激光 光源之間進(jìn)行切換,，當(dāng)需要使用外部激光光源系統(tǒng)時(shí),， 只需要通過(guò)軟件選擇激光測(cè)定模式即可，不需要通過(guò)其 它物理遮擋方式,，來(lái)遮擋儀器原有的激發(fā)光源,，這是 PerkinElmer 公司優(yōu)于其它公司的重要技術(shù)之一。這種操 作不僅延長(zhǎng)了原有氙燈的使用壽命,，而且也很好的限制 了由于物理遮擋導(dǎo)致的雜散光影響,；另外，由于采用了 靈活的可拆卸的樣品架套筒設(shè)計(jì),，如圖 1 所示,，不僅固 定了激光光源的輸出端，使之與樣品池垂直,，保證激光 光源能夠準(zhǔn)確的照射到待測(cè)樣品上而且,，在進(jìn)行常規(guī)熒 光測(cè)定時(shí)，容易取下,，大大簡(jiǎn)化了操作的繁瑣性,。

硬件配置 主機(jī)：LS-55 型熒光分光光度計(jì) ( 圖 2) 附件：激光光源及可拆卸樣品池套筒（圖 1）

樣品測(cè)試 測(cè)試條件 測(cè)試模式：激光測(cè)定模式 延遲時(shí)間：0ms 掃描范圍：300-700nm 掃描速度：1000nm/min

測(cè)試結(jié)果 改變不同條件測(cè)試 UCNP 上轉(zhuǎn)換材料得到的熒光發(fā)射 譜圖，如下圖 3 所示,。從圖可以看出樣品在 357nm,、 473nm、645nm 有熒光發(fā)射峰,，這三個(gè)發(fā)射峰是 UCNP 三個(gè)能級(jí)的光子發(fā)射,，其中在 473nm 處強(qiáng)，且熒光發(fā) 射峰窄且尖銳，半峰寬大約 10nm,，測(cè)試結(jié)果令人滿(mǎn)意,。

結(jié)論 PerkinElmer 公司的 LS-55 熒光光譜儀連接激光做光源的 熒光分析方法能夠準(zhǔn)確的測(cè)試上轉(zhuǎn)換材料的熒光發(fā)射峰， 測(cè)試結(jié)果良好,，為上轉(zhuǎn)換材料的發(fā)光表征提供了的解決方案,。該方法操作簡(jiǎn)單，使用方便,，成本低廉,，能 夠滿(mǎn)足絕大多數(shù)樣品的測(cè)試，并且易于拆卸,，也能滿(mǎn)足 常規(guī)樣品的測(cè)試,，是一個(gè)非常實(shí)用的解決方案。