BUNSEN本生：酶標(biāo)板如何處理,，增加抗體結(jié)合能力?

　　根據(jù)酶標(biāo)板與蛋白和其它分子結(jié)合能力的不同可以將酶標(biāo)板分為以下幾類(lèi)：

　　1 高結(jié)合力酶標(biāo)板：

　　酶標(biāo)板經(jīng)表面處理后蛋白結(jié)合能力大大增強(qiáng),，可達(dá)300~400ng IgG/cm2,，主要結(jié)合的蛋白分子量>10kD。使用該類(lèi)酶標(biāo)板可提高敏感性,，并可相對(duì)減少包被蛋白的濃度和用量，不足之處為較易產(chǎn)生非特異性反應(yīng),?？乖蚩贵w包被后，以非離子去污劑無(wú)法有效地封閉未結(jié)合蛋白的部位,，需使用蛋白作為封閉劑,。

　　2、中結(jié)合力酶標(biāo)板：

　　酶標(biāo)板經(jīng)表面疏水鍵被動(dòng)與蛋白結(jié)合,，適合作為分子量>20kD的大分子蛋白的固相載體,，其蛋白結(jié)合能力為200~300ng IgG/cm2。由于該類(lèi)酶標(biāo)板所具有的僅與大分子結(jié)合的特性,，適用于作為未純化抗體或抗原的固相載體,，可降低潛在的非特異性交叉反應(yīng)。該類(lèi)板可以惰性蛋白或非離子去污劑作為封閉液,。

　　3,、氨基化酶標(biāo)板：

　　酶標(biāo)板經(jīng)表面改性處理后擁有帶正電荷的氨基，其疏水鍵由親水鍵取代,。該類(lèi)酶標(biāo)板適合作為小分子蛋白的固相載體,。使用合適的緩沖液和pH值，其表面可通過(guò)離子鍵與帶負(fù)電荷的小分子結(jié)合,。由于其表面的親水特性和可通過(guò)其它交聯(lián)劑共價(jià)結(jié)合的能力,，可用于固定溶于Triton-100、Tween 20等去污劑的蛋白分子,。該類(lèi)板的缺陷為由于降低了疏水性,，一部分蛋白分子無(wú)法結(jié)合;此外，其表面需有效地封閉,。由于親水和共價(jià)的表面特性,，使用的封閉液必須能夠與非反應(yīng)性氨基基團(tuán)和所選擇的交聯(lián)劑中任何功能基團(tuán)發(fā)生作用。

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