光是電磁波,，波長100nm～400nm稱為紫外光， 400nm～780nm之間的光可被人眼觀察到,，大子780nm稱為紅外光。人們只所以能夠看到色彩,，是因為光照射到物體上被物體反射回來,。綠色植物之所以是綠色，是因為植物吸收了光中的紅色光譜,。酶標(biāo)儀測定的原理是在特定波長下,，檢測被測物的吸光值,。
　　檢測單位：
　　光通過被檢測物,，前后的能量差異即是被檢測物吸收掉的能量，特定波長下,，同一種被檢測物的濃度與被吸收的能量成定量關(guān)系,。
　　檢測單位用OD值表示， OD是optical delnsity（光密度）的縮寫,，表示被檢測物吸收掉的光密度,， OD＝1og（1／trans），其中trans為檢測物的透光值,。根據(jù)Bouger-amberT-beer法則,，OD值與光強度成下述關(guān)系：
E＝OD=logΙ0/Ι其中E表示被吸收的光密度， Ι0 為在檢測物之前的光強度,，Ι為從被檢測物出來的光強度,。
　　OD值由下述公式計算：
　　E＝OD=C×D×E
　　C為檢測物的濃度
　　D為檢測物的厚度
　　E為摩爾因子
　　在特定波長下測定每一種物質(zhì)都有其特定的波長，在此波長下,，此物質(zhì)能夠吸收最多的光能量,。如果選擇其它的波長段，就會造成檢測結(jié)果的不準(zhǔn)確,。因此,，在測定檢測物時，我們選擇特定的波長進(jìn)行檢測,，稱為測量波長,。
　　但是每一種物質(zhì)對光能量還存在一定的非特異性吸收，為了消除這種非特異性吸收,，我們再選取一個參照波長,，以消除這個不準(zhǔn)確性。在參照波長下,，檢測物光的吸收最小,。檢測波長和參照波長的吸光值之差可以消除非特異性吸收。
　　Anthos 酶標(biāo)儀檢測值計算
　　儀器中的檢測器接收透過被檢測物的光能量,，轉(zhuǎn)換成二進(jìn)位數(shù)字信號,，最大為4095。儀器定義沒有光源下的透光值為 0％，沒有檢測物的透光值為100％,。則實際檢測中,，檢測物的透光值均在 0％一100％之間。透光值
的計算如下：
　　T＝（Meas—Min）／（Max—Min）
　　其中T為透光值,， Meas為檢測的二進(jìn)位數(shù)值,， Min為在 0％的情況下檢測的二進(jìn)位數(shù)值， Max為在100％的情況下檢測的二進(jìn)位數(shù)值,，舉例如下：
　　MaX=3600 Mn=20 Meas＝30
　　T=（30-20）/3600-20)＝0．0028
　　OD＝1og（1/T）=1og（1/0.0028）=2.552
　　Anthos 酶標(biāo)儀的中心定位
　　儀器會自動對酶標(biāo)孔進(jìn)行中心定位,，中心定位是要消除酶標(biāo)孔底的凸凹引起的厚薄不均帶來檢測的不準(zhǔn)確。在對每一個酶標(biāo)儀進(jìn)行檢測時,，儀器其實要進(jìn)行35個點的測量,，選取最中間的5個點的均值為本孔的OD值。
　　光源的參照通道
　　參照通道是用來校準(zhǔn)由于電壓不穩(wěn)或燈泡磨損帶來的影響,。
　　酶標(biāo)儀的用途和其它提示
　　用于ELISA試劑的測定,，廣泛用于各種實驗室，包括臨床實驗室,。
　　質(zhì)量控制
　　質(zhì)量控制是試劑檢測的重要因素,。請按照試劑說明書的要求進(jìn)行質(zhì)量控制。
　　空白校正
　　有一些試劑盒的說陰書將空白孔設(shè)置為空氣,，其它大多數(shù)空白孔的設(shè)置是用試劑來設(shè)置的,，請按照試劑盒的說明書要求進(jìn)行。
　　檢測結(jié)果的解釋
　　由于有相當(dāng)多的因素會影響檢測的結(jié)果,，如不同的酶標(biāo)板,，檢測試劑的體積，都會造成OD值的不,，因此,，只有使用同一酶標(biāo)板反應(yīng)的試劑檢測結(jié)果才能比較和分析。對結(jié)果的臨床解釋請依照試劑盒的說明書進(jìn)行,。
酶標(biāo)儀的使用注意事項
1,、工作環(huán)境
　　酶標(biāo)儀是一種精密的光學(xué)儀器，因此良好的工作環(huán)境不僅能確保其準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性,，還能夠延長其使用壽命,。根據(jù)DIN VDE 0871條例，儀器應(yīng)放置在無磁場和干擾電壓的位置,。依據(jù)DIN 45 635 －19條例：
　　儀器應(yīng)放置在低于40分貝的環(huán)境下,。
　　為延緩光學(xué)部件的老化，應(yīng)避免陽光直射,。
　　操作時環(huán)境溫度應(yīng)在15℃－40℃之間,，環(huán)境濕度在15％－85％之間,。
　　操作電壓應(yīng)保持穩(wěn)定。
　　操作環(huán)境空氣清潔,，避免水汽,，煙塵。
　　保持干燥,、干凈,、水平的工作臺面，以及足夠的操作空間,。
2,、操作注意事項
　　酶標(biāo)儀的功能是用來讀取酶聯(lián)免疫試劑盒的反應(yīng)結(jié)果，因此要得到準(zhǔn)確結(jié)果,，試劑盒的使用必須規(guī)范,。許多醫(yī)院在使用酶標(biāo)儀之前是通過目測判斷結(jié)果,，操作過程隨意性較大,，在使用酶標(biāo)儀后如果不能及時糾正操作習(xí)慣，會造成較大誤差,。在酶標(biāo)儀的操作中應(yīng)注意以下事項：
　　使用加液器加液,，加液頭不能混用。
　　洗板要洗干凈,。如果條件允許,，使用洗板機洗板，避免交叉污染,。
　　嚴(yán)格按照試劑盒的說明書操作,，反應(yīng)時間準(zhǔn)確。
　　在測量過程中,，請勿碰酶標(biāo)板,，以防酶標(biāo)板傳送時擠傷操作人員的手。
　　請勿將樣品或試劑灑到儀器表面或內(nèi)部,，操作完成后請洗手,。
　　如果使用的樣品或試劑具有污染性、毒性和生物學(xué)危害,，請嚴(yán)格按照試
　　劑盒的操作說明,，以防對操作人員造成損害。
　　如果儀器接觸過污染性或傳染性物品,，請進(jìn)行清洗和消毒,。
　　不要在測量過程中關(guān)閉電源。
　　對于因試劑盒問題造成的測量結(jié)果的偏差,，應(yīng)根據(jù)實際情況及時修改參數(shù),，以達(dá)到最佳效果,。
　　使用后蓋好防塵罩。