四環(huán)素類抗生素為廣譜抗生素,，對(duì)革蘭氏陽性細(xì)菌和革蘭氏陰性細(xì)菌,、立克次氏體等均有抑制作用,。四環(huán)素類藥物進(jìn)入水產(chǎn)品領(lǐng)域已有多年,，該類藥物的濫用會(huì)給食品安全帶來隱患,。

根據(jù)GB 31656.11-2021，測(cè)定水產(chǎn)品中土霉素,、四環(huán)素、金霉素和多西環(huán)素殘留量的其中一法為高效液相色譜法,。其試驗(yàn)涉及標(biāo)準(zhǔn)溶液配制,，內(nèi)容如下：

1. 標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(100μg/mL)：分別準(zhǔn)確稱取適量標(biāo)準(zhǔn)品，用甲醇解釋定容配制成土霉素,、四環(huán)素,、金霉素和多西環(huán)素濃度均為100μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。-18℃以下避光儲(chǔ)存,，有效期1個(gè)月,。

2. 混合標(biāo)準(zhǔn)中間液:用Miragen電動(dòng)移液器分別準(zhǔn)確移取土霉素、四環(huán)素,、金霉素和多西環(huán)素標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液1.0,、1.0、2.0,、2.0mL于100mL容量瓶,，用甲醇釋并定容，配制成土霉素,、四環(huán)素,、金霉素和多西環(huán)素濃度分別為1.0、1.0,、2.0,、2.0μg/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)中間液。-18℃以下避光儲(chǔ)存有效期為7d,。

3. 標(biāo)準(zhǔn)曲線的備制

準(zhǔn)備4個(gè)10mL的容量瓶,，采用opus電子瓶口分配器（10mL款）的stepper模式,，設(shè)置分液體積0.5、1,、2,、5mL，然后排氣泡進(jìn)行分液,。4個(gè)體積的混合標(biāo)準(zhǔn)中間溶液分別加入4個(gè)容量瓶中,。

用甲醇-咪唑緩沖溶液定容至刻度，加上已有的混合標(biāo)準(zhǔn)中間液,，可得土霉素和四環(huán)素濃度分別為50,，100，200,，500,，1000ng/mL，金霉素和多西環(huán)素濃度分別為100,，200,，400，1000,，2000ng/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)系列工作溶液供高效液相色譜測(cè)定,。以待測(cè)物峰面積為縱坐標(biāo)、相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為橫坐標(biāo),，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,。計(jì)算回歸方程和相關(guān)系數(shù)。

實(shí)驗(yàn)室移取幾微升到幾毫升的液體,，一般采用移液器,。Miragen電動(dòng)移液器，數(shù)值靠設(shè)定或選定,，電機(jī)控制活塞運(yùn)動(dòng),。吸液和排液可分次數(shù)且各段體積可調(diào)，分液程序可儲(chǔ)存,，可實(shí)現(xiàn)單吸多排,、多吸單排等效果，有步驟少,、更穩(wěn)定,、調(diào)數(shù)快、模式多等諸多優(yōu)勢(shì),，可用于移液,、灌裝、逐滴補(bǔ)液，代替手動(dòng)移液器,、部分移液管和滴管,。

德國(guó)赫施曼的opus分液系列產(chǎn)品，可自動(dòng)連續(xù)分液,，且分液次數(shù),、間隔時(shí)間和流速均可調(diào)，既可進(jìn)行基礎(chǔ)的等體積分液,，也可進(jìn)行不等體積分液（每個(gè)體積均獨(dú)立可調(diào),，如分5次，體積分別為1.00,、2.00,、3.00、4.00,、5.00mL）,，單次分液量最小10uL，最da500mL,，可用于大批量移液,、稀釋劑補(bǔ)液（代替燒杯和玻璃棒），還可代替量筒,、移液器和部分移液管,。

赫施曼opus分液系列產(chǎn)品可與Miragen電動(dòng)移液器配合進(jìn)行快速的梯度稀釋，也可以配合容量瓶滿足更高精度要求的精密稀釋,，與常規(guī)的稀釋操作相比，讓稀釋配液更加簡(jiǎn)單,、便捷,、可靠！