高效液相色譜儀(HPLC)是應(yīng)用高效液相色譜原理,主要用于分析高沸點(diǎn)不易揮發(fā)的,、受熱不穩(wěn)定的和分子量大的有機(jī)化合物的儀器設(shè)備,。它由儲(chǔ)液器、泵,、進(jìn)樣器,、色譜柱、檢測器,、記錄儀等幾部分組成,。儲(chǔ)液器中的流動(dòng)相被高壓泵打入系統(tǒng),樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動(dòng)相,,被流動(dòng)相載入色譜柱(固定相) 內(nèi),,由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù),在兩相中做相對運(yùn)動(dòng)時(shí),,經(jīng)過反復(fù)多次的吸附- 解吸的分配過程,,各組分在移動(dòng)速度上產(chǎn)生較大的差別,,被分離成單個(gè)組分依次從柱內(nèi)流出,,通過檢測器時(shí),樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號(hào)傳送到記錄儀,,數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來,。HPLC廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)、食品科學(xué),、藥物研究以及環(huán)境研究中,。
儲(chǔ)液器中的流動(dòng)相被高壓泵打入檢測系統(tǒng),樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動(dòng)相,被流動(dòng)相載入色譜柱(固定相)內(nèi),,由于樣本溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù),,在兩相中作相對運(yùn)動(dòng)時(shí),經(jīng)過反復(fù)多次的“吸附-解吸”的分配過程,,各組分在移動(dòng)速度上產(chǎn)生較大的差別,,被分離成單個(gè)組分依次從柱內(nèi)流出,通過檢測器時(shí),,樣本濃度被轉(zhuǎn)換成電信號(hào)傳送到記錄儀,,數(shù)據(jù)以圖譜形式輸出檢測結(jié)果。
高效液相色譜法只要求樣品能制成溶液,,不受樣品揮發(fā)性的限制,,流動(dòng)相可選擇的范圍寬,固定相的種類繁多,,因而可以分離熱不穩(wěn)定和非揮發(fā)性的,、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質(zhì)。
與試樣預(yù)處理技術(shù)相配合,,HPLC 所達(dá)到的高分辨率和高靈敏度,,使分離和同時(shí)測定性質(zhì)上**相近的物質(zhì)成為可能,能夠分離復(fù)雜相體中的微量成分,。隨著固定相的發(fā)展,,有可能在充分保持生化物質(zhì)活性的條件下完成其分離。
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