由于體外培養(yǎng)的細(xì)胞自身沒有抵抗污染的能力，而在培養(yǎng)基中加抗生素的抗污染能力也是有限的,，一般在細(xì)胞受到污染早期或污染較輕時,，能及時處理并除去污染物，部分細(xì)胞還有可能得到挽救,。

通常情況下，會有哪些微生物會污染培養(yǎng)的細(xì)胞,？

一,、霉菌污染

污染的多是曲霉菌，白色念珠菌,，酵母菌,，黑霉菌，孢子菌等,。霉菌污染后多數(shù)在培養(yǎng)液中形成淡黃色或是白色的漂浮物,，一般肉眼可見，較易被發(fā)現(xiàn),，短期內(nèi)培養(yǎng)液多不變混濁,。
倒置顯微鏡下可以看見細(xì)胞之間有縱橫交錯穿行的絲狀，樹枝狀或管狀菌絲,，并漂浮在培養(yǎng)液中,。很多菌絲在高倍鏡下可以看見鏈狀排列的菌株。念珠菌及酵母菌菌株呈卵圓形,，散在細(xì)胞上及細(xì)胞周邊生長,。

二、酵母菌污染

酵母到處存在,，并能在合適的環(huán)境中快速生長,。酵母污染很容易觀察到，培養(yǎng)物變渾濁,，尤其在后期,。一般PH值變化很小，嚴(yán)重時,，PH值升高,。顯微鏡下呈卵圓形或球形顆粒，有些會長出較小顆粒,。

三,、耐藥細(xì)菌污染

細(xì)菌污染較常見的有大腸桿菌，白色葡萄球菌,，假單孢菌等,。加用抗菌素的培養(yǎng)液可預(yù)防和排除個別一般少量細(xì)菌的污染。一旦發(fā)生細(xì)菌污染很容易發(fā)現(xiàn),，多數(shù)情況下培養(yǎng)液短時間內(nèi)變黃,，表明有大量酸性物質(zhì)產(chǎn)生,，出現(xiàn)明顯渾濁現(xiàn)象；有時靜置的培養(yǎng)液起初不混,，但稍加震蕩,，就有許多混濁物漂起。

倒置顯微鏡下觀察,，有時在細(xì)胞表面及周圍有大量細(xì)菌存在,，細(xì)胞停止生長并有中毒表現(xiàn)，必要時可取少量培養(yǎng)液涂片染色檢查以明確細(xì)菌種類,。

四,、支原體污染

支原體是一種大小介于細(xì)菌和病毒之間(小直徑0.2um)并獨(dú)立生活的微生物．約有1%可通過濾菌器。支原體無細(xì)胞壁形態(tài)呈高度多形性,，可為圓形,、絲狀或梨形。

支原體形態(tài)多變,，在光鏡下不易看清內(nèi)部結(jié)構(gòu),。多數(shù)支原體適合于偏堿條件下生存(PH7.6-8.0)，對酸耐受性差,。對熱比較敏感,，對一般抗生素不敏感。

支原體污染細(xì)胞后,，培養(yǎng)液可不發(fā)生混濁,。多數(shù)情況下細(xì)胞病理變化輕微或不顯著，細(xì)微變化也可由于傳代,、換液而緩解,，因此易被忽視。但個別嚴(yán)重者,，可致細(xì)胞增殖緩慢,，甚至從培養(yǎng)器皿脫落。

為確定有無支原體污染可做如下檢測：熒光染色法支原體檢測,、PCR法支原體檢測,、qPCR支原體檢測、電鏡檢查,。

五,、黑膠蟲污染

黑膠蟲污染細(xì)胞后，細(xì)胞生長會變緩慢,，與細(xì)胞共生,，競爭營養(yǎng)，培養(yǎng)液可不發(fā)生混濁。細(xì)胞間隙內(nèi)出現(xiàn)小黑點(diǎn),，會不斷變多,，且對各類抗生素?zé)o效，顯微鏡下可以看到小黑點(diǎn)原地跳動,，細(xì)胞狀態(tài)變化會因?yàn)閭鞔?、換液而有所改善，因此易被忽視,。但個別嚴(yán)重者,，可致細(xì)胞空泡化，出現(xiàn)很多細(xì)胞碎片等,。

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