ABI VeritiPro PCR儀售后維修與使用操作步驟:
BI VeritiPro PCR儀操作步驟
1、打開PCR儀的熱蓋,,插入0.2ml的樣品管,。蓋好熱蓋。
2,、打開PCR儀的電源,,儀器程序開始初始化,需等待幾分鐘,。
3,、初始化完成后,,顯示主菜單:
4,、點“Browse/New Methods”,進入PCR程序列表:
5,、可以直接點一個PCR程序,,選擇“Start Run”運行;點右邊的符號,,可以選 擇不同的文件夾,。如要新建一個PCR程序,點“New”,,出現PCR程序:
6,、添加一段程序:點中上方的“Stage”位置,該位置變紅,;再點“Add”,,軟件將加入一段新的程序。
7,、修改循環(huán)數,、溫度、時間:點中循環(huán)次數,、溫度或時間位置,,下方出現數字鍵。依次點數字鍵,,出現合適數字后,,點“Done”確定。
8,、增加一個步驟:點“Step”位置,,該位置變紅;再點“Add”,,軟件將加入一個新的步驟,。
9、刪除一個步驟:點“Step”位置,,在點“Delete”,,軟件將該步驟刪除,。
10、建立梯度模式:
1)點中一個步驟,,再點“Option”鍵,,出現選項如下
2)點“VeriFlex step”,出現梯度創(chuàng)建窗口:
輸入6個梯度溫度,,溫度下方的“1-2”是指對應的1,、2兩行加熱孔,全部輸好后,,點“Done”確定,。注意:相鄰的兩個梯度溫度之差不能超過5℃!
11,、建立漸變模式:
1)點中一個步驟,,再點“Option”鍵,出現選項如下
2)點“Auto Delta”,,出現漸變模式創(chuàng)建窗口,。
點“Staring Cycle”,輸入起始循環(huán)數,;點“Delta Temperature”,,輸入溫度變化值;點“Delta Time”,,輸入時間變化值,。漸變模式適用于touchdown PCR,可以提高PCR反應的特異性,。例:輸入起始循環(huán)數為2,,溫度變化值為+0.5℃,時間變化值為+5s,,則表示從第2個循環(huán)開始,,每循環(huán)一次升溫0.5℃,時間增加5S.
12,、增加暫停步驟:
1)點中一個步驟,,再點“Option”鍵,出現選項如下
2)點“Pause”,,出現如下窗口,。
輸入暫停的起始位置,暫停間隔和暫停時間,,點“Done”確定,。上圖表示每隔10個循環(huán)暫停10s,在10個循環(huán)的第1個循環(huán)之前暫停。
13,、編輯PCR程序完成后,,點“Save”保存。
點“Run Method”,,輸入PCR程序名稱,;點 ,選擇保存PCR程序的文件夾(如 果要保存在USB文件夾中,,需要先插U盤),。再輸入反應體積和熱蓋溫度(這兩項在運行程序時可以修改)。點“SaveδExit”確定,。
14,、回到PCR程序列表界面,選擇新建的PCR程序,。
15,、點“Start Run”,,出現運行參數設置窗口
輸入反應體積和熱蓋溫度,,點“Start Run Now”開始運行PCR程序。
16,、儀器運行選中的PCR程序,,顯示運行監(jiān)視窗口
A- 運行狀態(tài)欄,顯示運行溫度和剩余時間
B- 加熱警示標記
C- 階段指示
D- 步驟溫度
E- 步驟時間
F- 步驟指示
G- 狀態(tài)報告,,顯示日期,、時間和儀器狀態(tài)
H- 延伸箭頭,點箭頭可以顯示更多的步驟
16,、暫停運行: 點“Pause Run”,,儀器暫停,出現暫停選項欄
“Remaining Time”顯示暫停剩余時間,,“Elapse Time”顯示已暫停時間,。
如果需要修改暫停時間,點 ,,輸入時間值,,點“Done”確定;點“Resume Run”,, 結束暫停,,繼續(xù)運行PCR程序。
7,、終止運行:點“Stop”可以終止整個PCR程序,。
18、反應報告:
PCR程序結束后,儀器會自動生成反應報告,,顯示當次反應的各項指數,。該報告可以保存和打印。
19,、PCR反應結束后,,打開熱蓋,取出樣品,,關閉儀器電源,。并開蓋放置,使熱蓋和加熱模塊正常降溫,。
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