1.避免壓力和溫度的急劇變化及任何機(jī)械震動,。溫度的突然變化或者使色譜柱從高處掉下都會影響柱內(nèi)的填充狀況,；柱壓的突然升高或降低也會沖動柱內(nèi)填料，因此，在調(diào)節(jié)流速時(shí)應(yīng)該緩慢進(jìn)行,，在閥進(jìn)樣時(shí)閥的轉(zhuǎn)動不能過緩,。

2.應(yīng)逐漸改變?nèi)軇┑慕M成，特別是反相色譜中,，不應(yīng)直接從有機(jī)溶劑改變?yōu)槿渴撬?，反之亦然?/span>

3.一般說來色譜柱不能反沖，只有生產(chǎn)者指明該柱可以反沖時(shí),，才可以反沖除去留在柱頭的雜質(zhì),。否則反沖會迅速降低柱效。

4.選擇使用適宜的流動相(尤其是pH),，以避免固定相被破壞,。有時(shí)可以在進(jìn)樣器前面連接一預(yù)柱，分析柱是鍵合硅膠時(shí),，預(yù)柱為硅膠,，可使流動相在進(jìn)入分析柱之前預(yù)先被硅膠“飽和”，避免分析柱中的硅膠基質(zhì)被溶解,。

5.經(jīng)常用強(qiáng)溶劑沖洗色譜柱,，清除保留在柱內(nèi)的雜質(zhì)。在進(jìn)行清洗時(shí),，對流路系統(tǒng)中流動相的置換應(yīng)以相混溶的溶劑逐漸過渡,，每種流動相的體積應(yīng)是柱體積的20倍左右。

下面列舉一些色譜柱的清洗溶劑及順序,，作為參考：

硅膠柱以正已烷(或庚烷),、二氯甲烷和甲醇依次沖洗，然后再以相反順序依次沖洗,，所有溶劑都必須嚴(yán)格脫水,。

甲醇能洗去殘留的強(qiáng)極性雜質(zhì)，已烷使硅膠表面重新活化,。反相柱以水,、甲醇、乙腈,、一氯甲烷(或氯仿)依次沖洗,，再以相反順序依次沖洗。如果下一步分析用的流動相不含緩沖液,，那么可以省略最后用水沖洗這一步,。

四氫呋喃與乙腈或甲醇的混合溶液能除去類脂。有時(shí)也注射二甲亞砜數(shù)次,。此外,，用乙腈、丙酮和三氟醋酸(0.1%)梯度洗脫能除去蛋白質(zhì)污染。

陽離子交換柱可用稀酸緩沖液沖洗,，陰離子交換柱可用稀堿緩沖液沖洗,，除去交換性能強(qiáng)的鹽，然后用水,、甲醇,、二氯甲烷(除去吸附在固定相表面的有機(jī)物)、甲醇,、水依次沖洗,。

6.保存色譜柱時(shí)應(yīng)將柱內(nèi)充滿乙腈或甲醇，柱接頭要擰緊,，防止溶劑揮發(fā)干燥,。絕對禁止將緩沖溶液留在柱內(nèi)靜置過夜或更長時(shí)間。

7.色譜柱使用過程中,，如果壓力升高,，一種可能是燒結(jié)濾片被堵塞，這時(shí)應(yīng)更換濾片或?qū)⑵淙〕鲞M(jìn)行清洗,；另一種可能是大分子進(jìn)入柱內(nèi),，使柱頭被污染；如果柱效降低或色譜峰變形,，則可能柱頭出現(xiàn)塌陷,，使體積增大。在后兩種情況發(fā)生時(shí),，小心擰開柱接頭,，用潔凈小鋼將柱頭填料取出1～2mm高度(注意把被污染填料取凈)再把柱內(nèi)填料整平。然后用適當(dāng)溶劑濕潤的固定相(與柱內(nèi)相同)填滿色譜柱,，壓平,，再擰緊柱接頭。這樣處理后柱效能得到改善,，但是很難恢復(fù)到新柱的水平,。柱子失效通常是柱端部分，在分析柱前裝一根與分析柱相同固定相的短柱(5～30mm),，可以起到保護(hù),、延長柱壽命的作用。采用保護(hù)柱會損失一定的柱效,，這是值得的,。通常色譜柱壽命在正確使用時(shí)可達(dá)2年以上。以硅膠為基質(zhì)的填料,，只能在pH=2～9范圍內(nèi)使用。柱子使用一段時(shí)間后，可能有一些吸附作用強(qiáng)的物質(zhì)保留于柱頂,，特別是一些有色物質(zhì)更易看清被吸著在柱頂?shù)奶盍仙稀?/span>

8.新的色譜柱在使用一段時(shí)間后柱頂填料可能塌陷,，使柱效下降，這時(shí)也可補(bǔ)加填料使柱效恢復(fù),。每次工作完后,，最好用洗脫能力強(qiáng)的洗脫液沖洗，例如,，ODS柱宜用甲醇沖洗至基線平衡,。當(dāng)采用鹽緩沖溶液作流動相時(shí)，使用完后應(yīng)用無鹽流動相沖洗,。含鹵族元素(氟,、氯、溴)的化合物可能會腐蝕不銹鋼管道,，不宜長期與之接觸,。裝在HPLC儀上柱子如不經(jīng)常使用，應(yīng)每隔4～5天開機(jī)沖洗15分鐘,。

Dionex IonPac CS20 IC 柱 離子色譜柱,，可在堿金屬后、堿土金屬前洗脫大多數(shù)胺類,，從而將讓定量分析變得極為困難的胺類從基質(zhì)離子上移除,。其選擇性使得 Dionex IonPac CS20 格外適合測定多種烷基胺和烷醇胺。