食品中維生素B₁₂的測定

維生素B₁₂標準品：

380-04112-S,，Vitamin B12

維生素B₁₂同位素內標：

380-04412-IS，[13C7]-Vitamin B12

準確稱取混合均勻的樣品2.0 g（精確至0.01g）于50 mL離心管中，加入20 mL去離子水溶液,，渦旋10 min,，

超聲15 min。于8000 r/min下離心10 min,，移取4 mL上清液,，待凈化。

SHIMSEN 維生素B₁₂免疫親和柱,，1000ng/3mL（貨號：380-00930-03）

（1）活化：加壓排出免疫親和柱中的保護液，棄去流出液,；

（2）上樣：準確移取上清液4 mL加入免疫親和柱中,，棄去流出液；

（3）清洗：當上樣液的液面下降到免疫親和柱中的管體處時（未全流干時）,，向柱中加入10 mL水,，棄去流出液，于負壓裝置（貨號：RT-26077）中將小柱抽干,；

（4）洗脫：關閉負壓裝置閥門,，向柱中加入2 mL甲醇，靜置2-3 min,，打開閥門,，收集流出液。

（5）重新溶解：向洗脫液中加入50 µL 0.1%甲酸水,，于50-60℃氮吹至近干,；再加入1 mL 0.1%甲酸水渦旋混勻，過0.22 µm尼龍濾膜（貨號：380-00321）,，待檢測,。

注意：

① 實驗中應控制柱流速不要超過1 mL/min；

② 免疫親和柱于2-8 ℃儲存,，不可冷凍,，使用前需要恢復到室溫。

食品中維生素B₁₂的測定 參考標準GB 5009.285-2022 第二法