一,、超氧化物歧化酶(SOD)是一種廣泛存在于生物體內(nèi)的金屬酶,,作為重要的氧自由基清除劑,,能催化超氧化物陰離子發(fā)生岐化作用,,生成H?O?和O?,。SOD不僅是超氧化物陰離子清除酶,也是H?O?主要生成酶,,在生物抗氧化系統(tǒng)中具有重要作用,。HUANG嘌呤及HUANG嘌呤氧化酶反應(yīng)系統(tǒng)能夠產(chǎn)生超氧陰離子(O??),O??可還原氮藍(lán)四唑生成藍(lán)色甲臜,,產(chǎn)物在560nm處具有特征吸收峰,;SOD可清除O??,從而抑制了甲臜的形成,,反應(yīng)液顏色越深,,表明SOD活性愈低,反之活性越高,,通過(guò)吸光值的變化即可表征SOD的活性,。
二、測(cè)定過(guò)程中所需要的儀器和試劑:可見(jiàn)分光光度計(jì),、1mL玻璃比色皿,、研缽/勻漿器、可調(diào)式移液器,、臺(tái)式離心機(jī),、恒溫水浴/培養(yǎng)箱和蒸餾水。
三,、吸光值測(cè)定:將反應(yīng)液置于1mL玻璃比色皿中測(cè)定560nm處吸光值,,記為A測(cè)定、A對(duì)照,、A空1,、A空2;計(jì)算ΔA測(cè)定=A測(cè)定-A對(duì)照,,ΔA空白=A空1-A空2,。注:空白管1和空白管2只需測(cè)定1-2管,每個(gè)樣本均需設(shè)一個(gè)對(duì)照管,。
四,、該試劑盒含有所有測(cè)定超氧化物歧化酶活性所需的試劑和溶液,使用了基于HUANG嘌呤氧化酶和全新顯色試劑的間接分析方法,。在該試劑盒中所用的顯色試劑的化學(xué)及生物化學(xué)特性保證了應(yīng)用的便利性和測(cè)試結(jié)果在寬范圍內(nèi)的線性,。超氧化物歧化酶是負(fù)責(zé)消除超氧自由基(O2-)的酶,從而可保護(hù)細(xì)胞免受自由基相關(guān)的損傷,。他們可催化兩個(gè)超氧化物自由基歧化為過(guò)氧化氫和氧氣,。
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