第一種：接種率測試

進(jìn)行接種率測試可以優(yōu)化出一個最合適的血清使用濃度?？梢?/span>把新到批次的血清按不同的濃度比例配制成血清細(xì)胞培養(yǎng)基,，例如5%、10%,、15%和20%濃度的血清細(xì)胞培養(yǎng)基,。然后以10-100個細(xì)胞/mL的濃度進(jìn)行接種，并分別使用上述不同血清濃度的血清細(xì)胞培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)2周,，觀察細(xì)胞的不同濃度下的細(xì)胞存活率以及細(xì)胞集落的面積變化，從而得出一個最合適的血清濃度,。

例如,，10%和15%的結(jié)果都可以接受的話，則應(yīng)使用10%進(jìn)行培養(yǎng),，一方面可以節(jié)省血清使用,，其次也可以降低血清存在時對細(xì)胞生長產(chǎn)生的其他不可控影響因素。

第二種：生長曲線

從生長曲線可以判斷不同批次間的血清對細(xì)胞生長的影響,。以正常培養(yǎng)的濃度進(jìn)行細(xì)胞接種,，并觀察記錄細(xì)胞達(dá)到不同的密度所需要用到的時間。

例如,，如果細(xì)胞使用這一批次的血清時,，其生長停滯期的時間較長,，說明細(xì)胞需要對這個批次的血清進(jìn)行較長時間的適應(yīng)后才能正常生長；如果細(xì)胞進(jìn)入指數(shù)增長期后,，倍增速度快,，也就是長得很快，說明這批次的血清對細(xì)胞的生長促進(jìn)效果很明顯,；如果細(xì)胞進(jìn)入平臺期后,，其密度比以往的血清批次要更高，說明該批次的血清的經(jīng)濟(jì)效率更高,，反之亦然,。

可以直接用MTT繪制細(xì)胞的生長曲線，也可以用可連續(xù)觀察的細(xì)胞計數(shù)儀或觀測系統(tǒng),。

第三種：細(xì)胞特征觀察

細(xì)胞特征觀察用于判斷該血清是否會存在一些影響因子,，對細(xì)胞的基因表達(dá)產(chǎn)生影響。

這個實驗對藥物篩選,、需要細(xì)胞定向分化或分泌物進(jìn)行的項目非常有必要,。

觀察細(xì)胞特征，除了要對細(xì)胞的形態(tài)特征進(jìn)行判斷,，還需要從分子和蛋白水平去檢測對比,。

例如在正常培養(yǎng)階段，提取細(xì)胞RNA進(jìn)行待研究的基因的表達(dá)分析,，看看血清是否會對該基因的表達(dá)產(chǎn)生上調(diào)或抑制,，如果有，那說明該血清的存在可能會影響你的課題實驗的結(jié)果準(zhǔn)確性,。

第四種：血清污染物的檢測

通常商業(yè)化的血清出廠前都會進(jìn)行嚴(yán)格的微生物清除,，但仍有極少數(shù)可能有部分的血清會存在支原體的污染，或在實驗室進(jìn)行血清分裝時帶入了微生物的污染,。

因此,，我建議，有條件的同學(xué)在使用血清前,，應(yīng)該先取一點血清或已配制完成的血清細(xì)胞培養(yǎng)基進(jìn)行空白培養(yǎng),，觀察其是否存在細(xì)菌、真菌等微生物的污染,，確認(rèn)沒有問題后再進(jìn)行正式的細(xì)胞培養(yǎng),。

而支原體污染的風(fēng)險，則只能通過PCR,、熒光染色等進(jìn)一步的實驗方法進(jìn)行檢測了,。

這里還需要特別強調(diào)的一點是，有的同學(xué)會通過看血清的顏色是否紅,、橙紅來判斷血清質(zhì)量,，這是玄學(xué),，沒有科學(xué)依據(jù)。

血清的顏色如果較紅,，代表其在采集過程中,，動物出現(xiàn)了一定程度的溶血，這和采集工藝有關(guān),，和血清本身質(zhì)量無關(guān),。

另外，血清解凍后,，有時會看到有一些絮狀物,，這種絮狀物也不一定是微生物污染，有可能是血清內(nèi)的蛋白質(zhì)凝集而成的,。

它的存在可能對細(xì)胞產(chǎn)生刺激,，不利于細(xì)胞生長，但血清還是可以用的,，這些絮狀物體積大無法通過過濾去除,，我們可以嘗試離心完成清除后繼續(xù)使用該瓶血清。