多肽是一種與生物體內(nèi)各種細(xì)胞功能都相關(guān)的生物活性物質(zhì),,它的分子結(jié)構(gòu)介于氨基酸和蛋白質(zhì)之間,是由多種氨基酸按照一定的排列順序通過(guò)肽鍵結(jié)合而成的化合物,。
多肽合成是一個(gè)以樹(shù)脂(人工合成的固相介質(zhì))為載體,,在一定的反應(yīng)條件下重復(fù)添加氨基酸,,經(jīng)過(guò)化學(xué)反應(yīng)后合成多肽的過(guò)程,多肽合成儀即是用來(lái)合成多肽的儀器,。一般情況下,,多肽合成儀整體由主體、傳輸設(shè)備,、動(dòng)力裝置以及軟件系統(tǒng)組成,。
多肽合成儀以固相合成為反應(yīng)原理,在密閉的防爆玻璃反應(yīng)器中使氨基酸按照已知順序(序列,,一般從C端-羧基端 向 N端-氨基端)不斷添加,、反應(yīng),、合成,操作最終得到多肽載體,。固相合成法,,大大的減輕了每步產(chǎn)品提純的難度。為了防止副反應(yīng)的發(fā)生,,參加反應(yīng)的氨基酸的側(cè)鏈都是保護(hù)的,。羧基端是游離的,并且在反應(yīng)之前必須活化,。固相合成方法有兩種,,即Fmoc和tBoc。由于Fmoc比tBoc存在很多優(yōu)勢(shì),,現(xiàn)在大多采用Fmoc法合成,,但對(duì)于某些短肽,tBoc因其產(chǎn)率高的優(yōu)勢(shì)仍然被很多企業(yè)所采用,。
具體合成由下列幾個(gè)循環(huán)組成:
1,、去保護(hù):Fmoc保護(hù)的柱子和單體必須用一種堿性溶劑(piperidine)去 除氨基的保護(hù)基團(tuán)。
2,、激活和交聯(lián):下一個(gè)氨基酸的羧基被一種活化劑所活化,。活化的單體與游離的氨基反應(yīng)交聯(lián),,形成肽鍵,。在此步驟使用大量的超濃度試劑驅(qū)使反應(yīng)完成。循環(huán):這兩步反應(yīng)反復(fù)循環(huán)直到合成完成,。
3,、洗脫和脫保護(hù):多肽從柱上洗脫下來(lái),其保護(hù)基團(tuán)被一種脫保護(hù)劑(TFA) 洗脫和脫保護(hù),。
相關(guān)產(chǎn)品
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