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能耐受PCR熱循環(huán)的Beadstar-mPlex®磁性熒光編碼微球

來源:碧芯生物科技(海南?。┯邢薰?nbsp;  2023年06月27日 16:37  

流式熒光法不僅能高通量檢測抗原,,還能高通量檢測核酸,?!”热缯f常見的項目HPV分型,,就非常合適用流式熒光法檢測,。然而如果僅僅只靠核酸雜交來獲得信號,,很難達到理想的靈敏度(雖然是懸浮芯片,,但也是固液相反應效率肯定不如液液反應效率)。因此懸浮芯片會采用先擴增,,再雜交的方法來放大信號,,提高檢測的靈敏度。為什么不在球上直接做擴增反應了,。這涉及到了熒光編碼微球是否耐熱的問題,。為了考察碧芯生物Beadstar-mPlex®磁性熒光編碼微球是否耐熱,我們做了一下研究工作,。

碧芯生物的Beadstar-mPlex®磁性熒光編碼微球能不能做雜交,?

可以,,在95度 3分鐘,48度1小時的雜交條件下,,能獲得較好的熒光信號(條件還在優(yōu)化中,,歡迎咨詢)

 

能不能直接再球上擴增,碧芯生物做了兩個嘗試,?

1 等溫擴增,。在球上直接進行滾環(huán)擴增(RCA, 文章已發(fā)表,doi.org/10.1016/j.cclet.2023.108141)和重組酶介導鏈替換核酸擴增技術(shù)(RAA,,文章在投)

 

2 PCR反應,。目前市面上多數(shù)的熒光編碼微球都難以耐受PCR的熱循環(huán),因此很少見到有直接在磁性熒光編碼微球上進行PCR再流式高通量分析核酸分子的產(chǎn)品,。為了填補這一塊的空白,,碧芯生物科技從我們在售的6微米羧基修飾的磁性熒光編碼微球中篩選出由23種耐95度的磁性熒光編碼微球的陣列,供需要在微球表面進行PCR反應的用戶選擇,。圖1為23群微球的陣列)


                                                                                  圖1:左圖為23群磁性熒光編碼微球未PCR的流式圖,;右圖為23群微球經(jīng)過一個PCR流程后的流式圖

         綜上所述, 碧芯生物Beadstar-mPlex®磁性熒光編碼微球有著的熱穩(wěn)定性,,不管您是PCR完了做雜交,,還是直接在球上PCR, 碧芯生物Beadstar-mPlex®磁性熒光編碼微球都可以幫您建立穩(wěn)定的檢測體系。

 PCR熱循環(huán)程序:

溫度(℃)

時間(s)

循環(huán)數(shù)(Cycle)

94

180

1

94

30

 

31

58

30

72

30

72

300

1

4

holding

1

 

 

 

 

 




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