離心是研究如細(xì)胞核、線粒體,、高爾基體,、溶酶體和微體，以及各種大分子基本手段,。一般認(rèn)為,，轉(zhuǎn)速為10~25Kr/min的離心機(jī)稱為高速離心機(jī)；轉(zhuǎn)速超過25Kr/min,，離心力大于89Kｇ者稱為超速離心機(jī),。目前超速離心機(jī)的zui高轉(zhuǎn)速可達(dá)100Kr/min，離心力超過500Kg,。

    （一）,、差速離心

    在密度均一的介質(zhì)中由低速到高速逐級(jí)離心，用于分離不同大小的細(xì)胞和細(xì)胞器,。在差速離心中細(xì)胞器沉降的順序依次為：核、線粒體,、溶酶體與過氧化物酶體,、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)與高基體、zui后為核蛋白體,。由于各種細(xì)胞器在大小和密度上相互重疊,，而且某些慢沉降顆粒常常被快沉降顆粒裹到沉淀塊中，一般重復(fù)2～3次效果會(huì)好一些,。差速離心只用于分離大小懸殊的細(xì)胞,，更多用于分離細(xì)胞器。通過差速離心可將細(xì)胞器初步分離,，常需進(jìn)一步通過密度梯離心再行分離純化,。

    （二）,、密度梯度離心

    用一定的介質(zhì)在離心管內(nèi)形成一連續(xù)或不連續(xù)的密度梯度，將細(xì)胞混懸液或勻漿置于介質(zhì)的頂部,，通過重力或離心力場(chǎng)的作用使細(xì)胞分層,、分離。這類分離又可分為速度沉降和等密度沉降平衡兩種,。密度梯度離心常用的介質(zhì)為氯化銫,，蔗糖和多聚蔗糖。分離活細(xì)胞的介質(zhì)要求：1）能產(chǎn)生密度梯度,，且密度高時(shí),，粘度不高；2）PH中性或易調(diào)為中性,；3）濃度大時(shí)滲透壓不大,；4）對(duì)細(xì)胞無毒。

    1,、速度沉降

    速度沉降主要用于分離密度相近而大小不等的細(xì)胞或細(xì)胞器,。這種降方法所采用的介質(zhì)密度較低，介質(zhì)的zui大密度應(yīng)小于被分離生物顆粒的zui小密度,。生物顆粒（細(xì)胞或細(xì)器）在十分平緩的密度梯度介質(zhì)中按各自的沉降系數(shù)以不同的速度沉降而達(dá)到分離,。

    2、等密度沉降

    等密度沉降適用于分離密度不等的顆粒,。細(xì)胞或細(xì)胞器在連續(xù)梯度的介質(zhì)中經(jīng)足夠大離心力和是夠長(zhǎng)時(shí)間則沉降或漂浮到與自身密度相等的介質(zhì)處,，并停留在那里達(dá)到平衡，從而將不同密度的細(xì)胞或細(xì)胞器分離,。等密度沉降通常在較高密度的介質(zhì)中進(jìn)行,。介質(zhì)的zui高密度應(yīng)大于被分離組分的zui大密度，而且介質(zhì)的梯度要求較高的陡度,，不能太平緩,。再者，這種方法所需要的力場(chǎng)通常比速率沉降法大10~100倍,，故往往需要高速或超速離心,，離心時(shí)間也較長(zhǎng)。大的離心力,、長(zhǎng)的離心時(shí)間都對(duì)細(xì)胞不利,。大細(xì)胞比小細(xì)胞更易受高離心力的損傷，而且停留在等密度介質(zhì)中的細(xì)胞比處在移動(dòng)中的細(xì)胞受到更大的損傷,。因此,，這種方法適于分離細(xì)胞器，而不太適于分離和純化細(xì)胞