層析柱是凝膠層析技術(shù)中的主體,,一般用玻璃管或有機(jī)玻璃管,。層析柱的直徑大小不影響分離度,樣品用量大,,可加大柱的直徑,,一般制備用凝膠柱,直徑大于2厘米,,但在加樣時應(yīng)將樣品均勻分布于凝膠柱床面上,。此外, 直徑加大,,洗脫液體體積增大,,樣品稀釋度大。分離度取決于柱高,,為分離不同組分,,凝膠柱床必須有適宜的高度,,分離度與柱高的平方根相關(guān),但由于軟凝膠柱過高擠壓變形阻塞,,一般不超過1米,。分族分離時用短柱,一般凝膠柱長20-30厘米,,柱高與直徑的比較5:1─10:1,,凝膠床體積為樣品溶液體積的4-10倍。 分級分離時柱高與直徑之線為20:1─100:1,,常用凝膠柱有50×25厘米,,10×25厘米。層析柱濾板下的死體積應(yīng)盡可能的小,,如果支掌濾板下的死體積大,,被分離組分之間重新混合的可能性就大,其結(jié)果是影響洗脫峰形,,出現(xiàn)拖尾出象,,降低分辯力。在分離時,,死體積不能超過總床體積的1/1000,。
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