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原理：將待測細胞經(jīng)特異性熒光染料染色后放入樣品管中，在氣體的壓力下進入充滿鞘液的流動室,。在鞘液的約束下細胞排成單列由流動室的噴嘴噴出，形成細胞柱,。流式細胞儀通常以激光作為發(fā)光源,。經(jīng)過聚焦整形后的光束，垂直照射在樣品流上,，被熒光染色的細胞在激光束的照射下,，產(chǎn)生散射光和激發(fā)熒光,。這兩種信號同時被前向光電二極管和90°方向的光電倍增管接收。光散射信號在前向小角度進行檢測,，這種信號基本上反映了細胞體積的大?。粺晒庑盘柕慕邮芊较蚺c激光束垂直,，經(jīng)過一系列雙色性反射鏡和帶通濾光片的分離,，形成多個不同波長的熒光信號。
流式細胞儀檢測哪些項目：
1,、流式細胞儀可以檢測細胞結(jié)構(gòu),，包括：細胞大小、細胞粒度,、細胞表面面積,、核漿比例、DNA含量與細胞周期,、RNA含量,、蛋白質(zhì)含量。
2,、流式細胞儀可以檢測細胞功能,，包括：細胞表面/ 胞漿/核的特異性抗原、細胞活性,、細胞內(nèi)細胞因子,、酶活性、激素結(jié)合位點和細胞受體,。
3,、流式可以檢測的樣本很多：
①細胞表面的蛋白，通過熒光抗體直接標記,。
②細胞內(nèi)部的蛋白,，細胞固定，通透后再用熒光抗體識別,。
③細胞內(nèi)部的DNA含量,，細胞固定，通透后加DNA染料,。
④細胞內(nèi)部鈣離子濃度,，直接加鈣離子濃度熒光染料染色,。
⑤細胞內(nèi)部線粒體膜電位,，比如JC-1，羅丹明染料,。
⑥使用微球陣列,，可以同時檢測溶液中數(shù)十種可溶性蛋白的濃度。
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