光阻法VS顯微計(jì)數(shù)法——脂質(zhì)體注射液不溶性微粒檢測不同方法測試對比

研究背景：

注射液的不溶性微粒檢測項(xiàng)是中國藥典中的必需檢測項(xiàng),，在2020版《中國藥典0903 不溶性微粒檢查》章節(jié)中推薦了兩種檢測方法,，包括光阻法和顯微計(jì)數(shù)法。法規(guī)中對于不同類型的樣品應(yīng)該采用哪種方法進(jìn)行檢測給出了一個(gè)簡短說明,，該文件中指出：光阻法不適用于黏度過高和易析出結(jié)晶的制劑，也不適用于進(jìn)入傳感器時(shí)易產(chǎn)生氣泡的注射劑,。

然而隨著各種新型制劑的出現(xiàn),，僅依據(jù)上述對于樣品性狀的描述，很難判斷應(yīng)該采用哪種方法進(jìn)行樣品的不溶性微粒檢測,。其中脂質(zhì)體類注射劑在近些年內(nèi)發(fā)展的尤為迅速,，因?yàn)樗鼈兊男螒B(tài)與細(xì)胞類似，并且可以通過一定的設(shè)計(jì)結(jié)合各種物質(zhì),，成為藥物遞送技術(shù)的理想載體,。本文將對一些脂質(zhì)體注射液采用不同的方法進(jìn)行不溶性微粒檢測，通過不同檢測方法的結(jié)果對比，以找出脂質(zhì)體類注射液不溶微粒檢測的最佳方案,。

測試案例：

案例一：某公司脂質(zhì)體注射液（樣品裝量信息：0.5毫升/瓶*4批）

光阻法測試方案：樣品原液0.5毫升稀釋10倍之后進(jìn)行測試,，每次測試取樣1毫升，連續(xù)測四次,，舍棄第一次測試結(jié)果,，最終統(tǒng)計(jì)每容器中尺寸≥10 μm的顆粒數(shù)以及≥25 μm的顆粒數(shù)；

顯微計(jì)數(shù)法測試方案：樣品原液進(jìn)行測試,，統(tǒng)計(jì)每容器中尺寸≥10 μm的顆粒數(shù)以及≥25 μm的顆粒數(shù),；

圖1：（a）不同批次樣品光阻法測試每次取樣的測試結(jié)果；（b）最終統(tǒng)計(jì)的每容器中的不同尺寸范圍的微粒數(shù)量,；

圖2：顯微計(jì)數(shù)法測試結(jié)果,，每容器中不同尺寸范圍的微粒數(shù)量；

在兩項(xiàng)檢查中可以看到樣品中的不溶性微粒數(shù)量都在藥典要求范圍之內(nèi),，但是該樣品進(jìn)行光阻法測試前對樣品進(jìn)行了稀釋操作,，可能會(huì)引發(fā)樣品內(nèi)的顆粒數(shù)量發(fā)生變化。

案例二：某公司的脂質(zhì)納米粒（樣品裝量信息：1.5 mL*1批）

光阻法測試方案：樣品原液測試,，單次進(jìn)樣量為0.1 mL,，連續(xù)測四次，舍棄第一次結(jié)果,，最終統(tǒng)計(jì)每毫升中尺寸≥10 μm的顆粒數(shù)以及≥25 μm的顆粒數(shù),；

顯微計(jì)數(shù)法測試方案：樣品原液進(jìn)行測試，統(tǒng)計(jì)每毫升中尺寸≥10 μm的顆粒數(shù)以及≥25 μm的顆粒數(shù),；

圖3：采用光阻法和顯微計(jì)數(shù)法對樣品進(jìn)行不溶性微粒檢測的不同尺寸范圍的顆粒數(shù)量統(tǒng)計(jì)

該樣品采用兩種方法進(jìn)行測試的結(jié)果測試對比差距較大,，光阻法測試結(jié)果中不同尺寸范圍的顆粒比較少，這歸因于測試過程中的進(jìn)樣量比較少,，可能無法完整覆蓋光阻法設(shè)備的光學(xué)檢測窗口,；另外通過顯微計(jì)數(shù)法測試結(jié)果的原始圖片數(shù)據(jù)可以看出，樣品中較大尺寸顆粒主要包括纖維,、藥物聚集及膠塞等,，這些顆粒的存在可能是造成樣品中不溶性微粒增多的原因之一。

數(shù)據(jù)分析與討論：

從上面的數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)結(jié)果分析來講,，脂質(zhì)體類樣品更適合用顯微計(jì)數(shù)法來進(jìn)行樣品的不溶性微粒檢測,，其原因如下：

1、脂質(zhì)體類樣品裝量較小,，通常為幾毫升,，甚至不到一毫升，樣品的稀釋可能會(huì)對樣品體系里的顆粒數(shù)量產(chǎn)生影響,，另外少量的樣品不一定能覆蓋光阻法設(shè)備的檢測窗口,，從而會(huì)產(chǎn)生測試誤差；

2、脂質(zhì)體類樣品具有一定的濁度,，采用光阻法進(jìn)行測試時(shí),，會(huì)形成測量誤差，可以看到單個(gè)樣品每次測試數(shù)據(jù)不穩(wěn)定,，這主要是歸因于光阻法原理設(shè)備測試渾濁樣品粒度存在固有缺陷,；

3、脂質(zhì)體類樣品中的顆粒大小會(huì)隨物理環(huán)境的變化形成聚集態(tài),，圖像法粒度儀可以直接觀察到這些顆粒,，亦可以觀察到外來顆粒，有利于顆粒的溯源分析,；

總結(jié)：

回歸到藥典法規(guī)文件的要求,，文件中指出：當(dāng)光阻法的測定結(jié)果不符合規(guī)定或者供試品不適用于用光阻法進(jìn)行測定時(shí)，應(yīng)采用顯微計(jì)數(shù)法進(jìn)行檢測,，并且以顯微計(jì)數(shù)法的測定結(jié)果為判定依據(jù),。經(jīng)過對脂質(zhì)體案例測試結(jié)果的分析可以看出，脂質(zhì)體類注射劑的不溶性微粒檢查項(xiàng)應(yīng)優(yōu)先推薦顯微計(jì)數(shù)法,。

相關(guān)設(shè)備介紹：

YH-LEIP-0201 光阻法不溶性微粒分析儀

√滿足《中國藥典》要求,；

√可直接檢測注射液、無菌液,、輸液器具及包材等不溶性微粒的數(shù)量及大?。?/span>

√可檢測有色樣品,。

YH-MIP-0205 Pro顯微計(jì)數(shù)法不溶性微粒分析儀

√ 全濾膜自動(dòng)掃描,，操作簡單，節(jié)約時(shí)間,；

√ 全自動(dòng)顆粒計(jì)數(shù)，保護(hù)眼睛,，減少人為操作誤差,；

√ 符合各國藥典/ 國標(biāo)法規(guī)，一鍵自動(dòng)出具對應(yīng)報(bào)告,；

√ 符合 21CFR Part11 及 GMP 對數(shù)據(jù)完整性的要求,。

胤煌科技(YinHuang Technology)是一家專注于為醫(yī)藥、半導(dǎo)體及化工材料等行業(yè)提供檢測分析設(shè)備及技術(shù)服務(wù)的高科技公司,，致力于為客戶提供全面,、準(zhǔn)確的檢測分析和解決方案。主營產(chǎn)品包括不溶性微粒分析儀,，可見異物檢查分析儀,，原液粒度及Zeta電位分析儀，CHDF高精度納米粒度儀，高分辨納米粒度儀,，溶液顏色測定儀,，澄清度測定儀等，公司自主研發(fā)的YH-MIP系列顯微計(jì)數(shù)法不溶性微粒儀,、YH-FIPS系列流式動(dòng)態(tài)圖像法粒度儀,，YH-FIPS系列微流成像顆粒分析儀已經(jīng)在生物醫(yī)藥、半導(dǎo)體及材料化工領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用,。