溶液的配制

1,、稀釋抗體溶液：將抗體濃縮液搖勻,，用緩沖液10倍稀釋抗體濃縮液，現(xiàn)用現(xiàn)配,。

2,、稀釋酶結(jié)合物：將酶結(jié)合物濃縮液搖勻，用緩沖液10倍稀釋酶結(jié)合物濃縮液,，現(xiàn)用現(xiàn)配,。

3、底物溶液的配制：用底物緩沖液10倍稀釋底物濃縮液,，根據(jù)需要的量現(xiàn)用現(xiàn)配,，底物溶液變藍禁止使用。

七,、樣品的前處理方法：

    牛奶：新鮮牛奶或解凍牛奶50µL,，加水950µL，1：20稀釋,，作樣品液備用,。

八、檢測步驟：

1,、剪開錫箔袋,，按每個標準液和樣品提取液2孔計算所需微孔板條的數(shù)量，插入框架,。

2,、各取系列標準液和樣品液20µL分別加到其對應(yīng)微孔中,，每個標準和樣品加雙孔。

3,、每孔加稀釋好的酶結(jié)合物20µL,。

4、每孔加稀釋好的抗體100µL,，在MicBio-IV微孔板恒溫振蕩器上*混勻,，用封口膜封好，室溫孵育30分鐘,。

5,、倒出孔內(nèi)液體，在吸水紙上拍打,，使孔中沒有殘留的液體,。使用多道移液器，每孔加水250µL,，再傾倒干凈,。如此洗板，重復(fù)三次,。

6,、每孔加底物溶液100µL，室溫避光孵育30分鐘,。

7 ,、每孔加終止液100µL，混勻,。

8 ,、在450nm波長處測吸光度值。60分鐘內(nèi)讀數(shù),。