RNA質(zhì)控,，我來幫你,！
 
小編心里話：RNA質(zhì)控是個技術(shù)活兒,！
 
對于每天泡在實驗室的人來說,，qPCR已是家常便飯,。毫無疑問濃度高,，純度好,，片段完整,，才是我們理想中的RNA樣品,。然而，RNA總是嬌氣的存在,！室溫或4度極易降解,，提取的時候容易有污染物殘留。因此完整的RNA質(zhì)控包含了三個方面：濃度質(zhì)控,，純度質(zhì)控,，片段完整性質(zhì)控。
 
如何把控RNA質(zhì)量,，繼續(xù)反轉(zhuǎn)錄呢,？
 
有一款RNA質(zhì)控的高手，既可以提供RNA濃度質(zhì)控,，也可以提供RNA純度質(zhì)控,，沒錯，就是美國Denovix公司提供的DS-11FX超微量紫外/熒光全功能分光光度計,，看上去酷酷的RNA純度質(zhì)控的標(biāo)準(zhǔn)方法是超微量分光光度計（光吸收）法,，通過監(jiān)控A260/230和A260/280的比值來判定RNA的純度。通常A260/280的比值范圍在1.8-2.0之間,，如果大于2.0則說明RNA已經(jīng)降解,，如果低于1.8則說明含有蛋白質(zhì)或其他雜質(zhì),；而A260/230的比值如果小于2，則表明RNA中含有酚類,，鹽等雜質(zhì),。DS-11FX的微量光度計功能可以幫助科研人員來準(zhǔn)確的判定RNA樣品的純度。
 
下圖為RNA紫外法檢測示意圖,，A260/280和A260/230都不在正常的比值范圍,，說明RNA樣品純度很差，儀器會自動進行提示,，兩個黃色小三角就是警示圖標(biāo)哦,，點擊萌萌的黃色三角警示，儀器會顯示污染物的種類,，夠智能吧,，這就是DS-11的SmartQC功能

圖1 總RNA的測量界面圖（美國DeNovix，DS-11FX）
 
RNA濃度質(zhì)控的標(biāo)準(zhǔn)方法是熒光法,，除非是純度很高的RNA也可以采用紫外法,。熒光法采用RNA特異性染料，可以準(zhǔn)確的測量RNA濃度,。DS-11FX不但提供RNA濃度質(zhì)控,，也可以提供DNA和蛋白的濃度精確控制，功能超級強大哦,。
 
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發(fā)表在Cell stem cell的文章PAX3 Confers Functional Heterogeneity in Skeletal Muscle Stem Cell Responses to Environmental Stress,，作者提取衛(wèi)星細(xì)胞的總RNA，采用DS-11FX超微量/熒光全功能分光光度計進行RT-PCR之前的RNA的質(zhì)量把控和濃度鑒定,。