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美國corning(康寧)細胞計數(shù)儀常見問題

來源:迪圖(上海)生物科技有限公司   2023年05月27日 23:11  

康寧細胞計數(shù)儀(貨號為6749)可計數(shù)的細胞大小和濃度范圍是多少?
可計數(shù)的細胞大小范圍為4~70 μm,細胞濃度范圍為5 x 104~1.0 x 107細胞/mL,。

康寧細胞計數(shù)儀能否對活細胞和死細胞進行區(qū)分,?
可以。通過細胞懸液與臺盼藍1:1混合,,臺盼藍會將死細胞染成深藍色,,而活細胞則不被臺盼藍染色。將混合液加入計數(shù)板中計數(shù)時,,在軟件頁面選擇“trypanblue,, yes (1:1)”, 計數(shù)儀會自動分析死活細胞的數(shù)量及比例,并將結果直接展示在結果區(qū),,該結果無需再乘以2,。

康寧細胞計數(shù)儀能否對細胞團簇進行區(qū)分并準確計數(shù)?
可以分析含有細胞簇的樣品,。以下是對于293T細胞計數(shù)的測試圖片供您參考,,兩圖中紅圈圈出部分是細胞團簇,右圖中綠點代表檢測到的活細胞,,紅點代表識別的死細胞,。


計數(shù)時,視野中心細胞清晰,,而邊緣細胞對焦不清晰,,尤其是小于10um的細胞,是否會影響計數(shù)結果,?
由于計數(shù)儀鏡頭是球形的,,在對焦準確時,即使邊緣的對焦不是很清晰,,儀器仍然會對視野中計數(shù)范圍內(nèi)(4-70 μm)的細胞進行計數(shù),。若您對計數(shù)結果的準確性有較高的要求,建議您拍攝多張圖片進行計數(shù),,軟件可以將多張圖片中的結果整合取平均數(shù),,以提高計數(shù)準確性。

如何更好地對焦, 從而確保計數(shù)準確,?
為了準確地計數(shù)分析,,需要確保對焦準確。通過聚焦旋鈕多次順時針或逆時針旋轉(zhuǎn),,并且可以進一步放大圖像觀察,,能夠看到活細胞有明亮的中心和清晰的邊緣,如下圖所示,,左側圖為未成功對焦,,而右側圖中對焦準確:


 

康寧細胞計數(shù)儀能否對外周血單核細胞(PBMC)進行計數(shù),?
可以。PBMC細胞大小約7-8 μm,,符合康寧細胞計數(shù)儀的計數(shù)范圍,。在對PBMC計數(shù)時,需要注意避免碎片等非細胞雜質(zhì)被識別成死細胞從而影響結果,,因此準確對焦非常重要,。死細胞在對準焦后呈現(xiàn)出實心黑點的樣子,如下圖所示,,盡可能避免對焦后有光環(huán)或模糊狀的存在,。

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