康寧細(xì)胞計數(shù)儀（貨號為6749）可計數(shù)的細(xì)胞大小和濃度范圍是多少?
可計數(shù)的細(xì)胞大小范圍為4～70 μm,，細(xì)胞濃度范圍為5 x 104～1.0 x 107細(xì)胞/mL,。

康寧細(xì)胞計數(shù)儀能否對活細(xì)胞和死細(xì)胞進(jìn)行區(qū)分,？
可以,。通過細(xì)胞懸液與臺盼藍(lán)1:1混合,，臺盼藍(lán)會將死細(xì)胞染成深藍(lán)色,，而活細(xì)胞則不被臺盼藍(lán)染色,。將混合液加入計數(shù)板中計數(shù)時,，在軟件頁面選擇“trypanblue,， yes (1:1)”, 計數(shù)儀會自動分析死活細(xì)胞的數(shù)量及比例，并將結(jié)果直接展示在結(jié)果區(qū),，該結(jié)果無需再乘以2,。

康寧細(xì)胞計數(shù)儀能否對細(xì)胞團(tuán)簇進(jìn)行區(qū)分并準(zhǔn)確計數(shù)？
可以分析含有細(xì)胞簇的樣品,。以下是對于293T細(xì)胞計數(shù)的測試圖片供您參考,，兩圖中紅圈圈出部分是細(xì)胞團(tuán)簇，右圖中綠點代表檢測到的活細(xì)胞,，紅點代表識別的死細(xì)胞,。

計數(shù)時，視野中心細(xì)胞清晰,，而邊緣細(xì)胞對焦不清晰,，尤其是小于10um的細(xì)胞，是否會影響計數(shù)結(jié)果,？
由于計數(shù)儀鏡頭是球形的,，在對焦準(zhǔn)確時，即使邊緣的對焦不是很清晰,，儀器仍然會對視野中計數(shù)范圍內(nèi)（4-70 μm）的細(xì)胞進(jìn)行計數(shù),。若您對計數(shù)結(jié)果的準(zhǔn)確性有較高的要求，建議您拍攝多張圖片進(jìn)行計數(shù),，軟件可以將多張圖片中的結(jié)果整合取平均數(shù),，以提高計數(shù)準(zhǔn)確性。

如何更好地對焦, 從而確保計數(shù)準(zhǔn)確,？
為了準(zhǔn)確地計數(shù)分析,，需要確保對焦準(zhǔn)確。通過聚焦旋鈕多次順時針或逆時針旋轉(zhuǎn),，并且可以進(jìn)一步放大圖像觀察,，能夠看到活細(xì)胞有明亮的中心和清晰的邊緣，如下圖所示,，左側(cè)圖為未成功對焦,，而右側(cè)圖中對焦準(zhǔn)確：


 

康寧細(xì)胞計數(shù)儀能否對外周血單核細(xì)胞（PBMC）進(jìn)行計數(shù),？
可以。PBMC細(xì)胞大小約7-8 μm,，符合康寧細(xì)胞計數(shù)儀的計數(shù)范圍,。在對PBMC計數(shù)時，需要注意避免碎片等非細(xì)胞雜質(zhì)被識別成死細(xì)胞從而影響結(jié)果,，因此準(zhǔn)確對焦非常重要,。死細(xì)胞在對準(zhǔn)焦后呈現(xiàn)出實心黑點的樣子，如下圖所示,，盡可能避免對焦后有光環(huán)或模糊狀的存在,。