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液相色譜分析,,如何高效解決“煩人“的溶劑效應(yīng)

來源:深圳市諾亞迪化學(xué)科技有限公司   2023年05月24日 14:11  

溶劑效應(yīng)(solvent effect)亦稱“溶劑化作用”,,指液相分析中,,溶劑的物理和化學(xué)性質(zhì)影響反應(yīng)平衡和反應(yīng)速度的效應(yīng),,可能造成色譜峰展寬,、分叉、保留時間漂移,、峰面積變化,,雙峰等現(xiàn)象,。與此同時,較早洗脫的峰出現(xiàn)前延或分叉,。

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產(chǎn)生溶劑溶劑效應(yīng)后,,我們常見的解決辦法是用流動相溶解樣品或減小進樣量。可是,,用流動相溶解樣品真的是解決溶劑效應(yīng)的好辦法嗎,?下面分別以制藥和食品檢測領(lǐng)域的兩位客戶的真實案例來闡述。



案例一:藥企碰到的液相色譜困境

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某制藥企業(yè)生產(chǎn)的塞來昔布,,是目前全球處方量最大的非甾體類抗炎鎮(zhèn)痛藥(NSAIDs),。企業(yè)參考美國藥典論壇方法,建立了塞來昔布雜質(zhì)D的HPLC-UV測定法,,對塞來昔布膠囊中可能存在的雜質(zhì)D進行檢測,,可以更好的控制塞來昔布及其制劑的產(chǎn)品質(zhì)量。


實驗結(jié)果:

參考美國藥典色譜條件,,在液相色譜儀上進樣雜質(zhì)D對照品溶液,,結(jié)果顯示雜質(zhì)D峰出現(xiàn)峰前延,。

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考慮到樣品配制用溶劑和流動相不一致,存在樣品溶液與流動相的兼容性問題,可能引起溶劑效應(yīng),。為證明溶劑效應(yīng)的存在,,改用流動相稀釋雜質(zhì)D對照品溶液,,在相同儀器上重新進樣,,結(jié)果顯示雜質(zhì)D峰形正常。


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用流動相溶解樣品,,帶來的困擾


表面上,,采用流動相溶解樣品后,“煩人”的溶劑效應(yīng)問題解決了,。可是,,卻給企業(yè)帶來了新困擾?


困擾1:藥典或國標(biāo)等部門制定的方法不能隨意改變,,更換樣品溶劑通常認(rèn)為是對方法的改變,,一般不被允許,如要改變,,必須通過一系列復(fù)雜的方法學(xué)驗證之后才可以,。

困擾2:塞來昔布雜質(zhì)D對照品價格極其昂貴,100mg近萬元,,改為用流動相溶解樣品后,,由于流動相中有水,配置的標(biāo)準(zhǔn)品極易長菌,,保質(zhì)期非常短,,而且樣品不穩(wěn)定,。這樣企業(yè)需要頻繁的配置,會造成標(biāo)準(zhǔn)品的浪費,,檢測成本也無形中提高了。

困擾3:改為用流動相溶解樣品后,,原本一年才配置一次標(biāo)準(zhǔn)曲線,,現(xiàn)在不到半個月就需要配置一次。原本已經(jīng)飽滿的實驗室工作,,現(xiàn)在又額外增加不少工作量,,勞心費力


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溶劑效應(yīng)消除器,,小配件大作用


使用溶劑效應(yīng)消除器后,,沒想到,幾千元的小配件(可以使用3-5年,,每天不到1元錢),,解決了藥企的煩惱,不用改變色譜條件,,而且解決了溶劑效應(yīng)問題,。


溶劑效應(yīng)消除器接于液相色譜進樣器與色譜柱之間,參考美國藥典論壇色譜條件進樣雜質(zhì)D對照品溶液,。結(jié)果顯示雜質(zhì)D峰形正常,。

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注:圖譜來源于廣州匯元醫(yī)藥科技有限公司


注:以上僅是眾多藥物分析中一個案例。我們翻看2020版中國藥典,,不少品種(比如:2020版二部P630 妥布霉素),,為避免分析中出現(xiàn)溶劑效應(yīng),不得已采取了流動相或純水溶解,,


有了溶劑效應(yīng)消除器后,,就可以使用保存期更長或溶解性更好的甲醇或乙腈來溶解,就可以避免上述藥企出現(xiàn)的困境,。

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案例二:氮吹溶劑置換,,帶來的困擾

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GB 31656.8-2021水產(chǎn)品中有機磷農(nóng)藥的測定,按照國標(biāo)的操作,,檢測工作者遇到了以下困擾:
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氮吹溶劑置換,,帶來的困擾


困擾1國標(biāo)的前處理過程非常繁瑣,樣品提取后,,45℃氮吹,,由于有機磷農(nóng)藥易揮發(fā),溫度不能太高,,氮吹時間差不多2-3小時,。如此漫長的氮吹,,實在無法忍受。(注:樣品中有機磷農(nóng)藥的含量比較高,,之所以需要氮吹,,主要目的是為了溶劑置換,避免分析過程中的溶劑效應(yīng))

困擾2:氮吹不能全吹干,,否則有機磷農(nóng)藥的回收率受到較大影響,。可是,,吹至近干,,一方面時間非常不好控制,快到最后一些時,,需密切關(guān)注氮吹過程,。另一方面,即使吹至是近干,,還是一部分有機磷農(nóng)藥的回收率會受到一些影響,。


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溶劑效應(yīng)消除器,省去了漫長的氮吹


加裝溶劑效應(yīng)消除器后,,大大的簡化了前處理步驟,,無需溶劑置換,可省去氮吹過程(2-3小時),,過濾膜后直接進樣,。而且,部分有機磷農(nóng)藥的回收率較大提高了,。

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有了溶劑效應(yīng)消除器神器后,,客戶在后續(xù)的一個課題中,還應(yīng)用了溶劑效應(yīng)消除器發(fā)表了一篇不錯的文章(文章發(fā)表中,,暫不透露圖片


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省去氮吹,,過濾膜后直接進樣的對比圖


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注:以上圖譜來源于某國家檢測單位


注:如果在分析中用流動相溶解樣品不好,只能使用純甲醇或純乙腈來溶解樣品,,此時更應(yīng)使用溶劑效應(yīng)消除器,,解決分析中溶劑效應(yīng)的問題。


比如:最近比較熱的全氟化合物的分析,,用流動相溶解樣品后,,發(fā)現(xiàn)長鏈化合物基本沒有響應(yīng),經(jīng)過反復(fù)試驗,,才發(fā)現(xiàn)長鏈PFAS用流動相溶解不好,,改為純甲醇后,能實現(xiàn)充分溶解??墒?,上機分析時,又出現(xiàn)明顯的溶劑效應(yīng)問題,。此時,,加裝溶劑效應(yīng)消除器后可較好解match決這個問題。

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溶劑效應(yīng)消除器

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歷時5年潛心打磨和研發(fā)的新產(chǎn)品,,可有效解決樣品溶劑與流動相匹配性不好而產(chǎn)生的各類色譜問題:

  • 大程度降低樣品溶劑和流動相差異所產(chǎn)生的色譜分析問題

  • 顯著改善峰形,、提高柱效

  • 色譜基線更平穩(wěn)、出峰時間更穩(wěn)定

  • 提高分離度和雜質(zhì)檢出能力


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(譜寧發(fā)明zl,,zl號: 201510005647.8)


常用型號:
HPLC型,耐壓40MPa,,描述:Solvent-Smoother Solvs-AB,,貨號:AN80C036
UPLC型,耐壓100MPa,,描述:Solvent-Smoother Solvs-UP,,貨號:AN80C037



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