目前使用瓊脂糖凝膠DNA回收試劑盒回收的DNA可適用于各種常規(guī)操作,包括酶切,、PCR、測(cè)序,、文庫(kù)篩選、連接和轉(zhuǎn)化等試驗(yàn),。本試劑盒采用了柱純化的原理,,適合從多至400mg瓊脂糖凝膠中回收DNA(70bp-10kb),回收率為70~85%,。溶膠試劑為不含溫和溶解液,,確保回收的DNA保持片斷完整性和高生物學(xué)活性,。在選擇DNA提取試劑盒時(shí),,重要的變量可能是你所使用的生物體,。
1.細(xì)菌:許多試劑盒都有用于細(xì)菌DNA分離的不同成分,,這些試劑盒之間的主要區(qū)別在于細(xì)胞是如何被分解的,因?yàn)橛行┘?xì)菌比其他細(xì)菌更更有挑戰(zhàn)性,。
2.動(dòng)物組織:用于動(dòng)物組織DNA分離的試劑盒通常具有更溫和的裂解技術(shù),,因?yàn)榇蠖鄶?shù)動(dòng)物細(xì)胞不像細(xì)菌細(xì)胞那樣有細(xì)胞壁。然而,,動(dòng)物組織DNA提取的挑戰(zhàn)往往在于選擇合適的組織勻漿方法,。此外,許多動(dòng)物DNA純化試劑盒不使用苯酚/氯萃取或乙醇作為沉淀步驟,,以減少破壞DNA的風(fēng)險(xiǎn),。
3.植物:當(dāng)涉及到植物DNA分離時(shí),必須考慮到其他一些因素,,需要注意污染物的去除,。
植物在純化過程中通常含有未分離的糖,因此,,洗滌劑選擇性地與DNA結(jié)合并從溶液中析出,,通常是先將洗滌劑溶解在高濃度的鹽溶液中,,然后提取DNA。
4.血液:由于技術(shù)上的許多新進(jìn)展,,血液DNA分離試劑盒中有多種裂解技術(shù)和提取方法可供選擇,。從血液中分離出的DNA將在很大程度上決定你使用的裂解和提取的類型。
無論應(yīng)用是什么,,一定要選擇一種能夠提供純凈,、完整、雙鏈和濃縮DNA的試劑盒,,以獲得好的效果,。
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