血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物,，其組成成份雖大部分已知，但是由于血清成分十分復(fù)雜,，直至今天,，血清中的所有成分仍未wan全分析出來，且血清組成及含量常隨供血動物的性別,、年齡,、生理條件和營養(yǎng)條件不同而發(fā)生改變。血清中含有各種血漿蛋白、多肽,、脂肪,、碳水化合物、生長因子,、激素、無機物等,，這些物質(zhì)對促進細(xì)胞生長或抑制生長活性是達(dá)到生理平衡的,。

牛血清的區(qū)別

牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中重要的天然培養(yǎng)基，含有豐富的細(xì)胞生長必須的營養(yǎng)成份,，常用于動物細(xì)胞的體外培養(yǎng),。可以劃分為：胎牛血清、新生牛血清,、小牛血清,、成牛血清。

? 胎牛血清（Foetal Bovine Serum,，簡稱FBS）：胎牛血清是指懷孕3-8個月的母牛被屠宰后,，發(fā)育未wan全的胎牛心臟密閉穿刺采血后，通過一系列工藝處理最終獲得,。此時胎牛血中含有特殊的生長發(fā)育因子,，一旦胚胎發(fā)育wan全這些因子會自動消失。

? 新生牛血清（Newborn Calf Serum,，簡稱NBCS）：出生14小時內(nèi)未進食的新生牛,，通常采用頸動脈采集血液分離得到的血清。

?小牛血清(Calf serum, CS)：取自出生后3天至6個月的健康小牛,，動脈采血分離血清,；

?成牛血清（Adult Bovine Serum，簡稱ABS）：取自健康的成年牛,，收全血后分離得到血清,。

胎牛血清是品質(zhì)相對較高的，因為胎牛還未接觸外界,，血清中所含的抗體,、補體等對細(xì)胞有害的成分最少。

某些細(xì)胞必需胎牛血清才能生長,，而有些細(xì)胞只需小牛血清即可,。使用濃度一般在5%-10%，有特殊要求的濃度在20%,。

牛血清的保存

未拆封的牛血清,，一般情況下應(yīng)存放于-10℃至-20℃，在產(chǎn)品規(guī)定的效期內(nèi)均可使用，若一次無法用完一瓶,，建議無菌分裝血清至合適大小的無菌離心管內(nèi),，再放回冷凍。

牛血清在放入冷凍環(huán)境前,，建議瓶中預(yù)留一定的體積空間,，避免血清凍結(jié)后體積增大，撐破包裝瓶,，形成污染,。

牛血清的使用

將牛血清從冷凍冰箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之融解,，然后在室溫下使之全融,，或通過水浴鍋促使其溶解。但必須注意的是,，融解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻,。wan全溶解后建議盡快使用，若長時間儲存在2-8℃,，血清中的各種（脂）蛋白（如冷凝集素,、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等）可能因凝集而形成沉淀或可見的混濁,。

牛血清的沉淀處理

牛血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因,，但普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成，而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解凍后,，也會存在于血清中,，亦是造成沉淀物的主要原因之一。但這些絮狀沉淀物,，并不影響血清本身的質(zhì)量,。若欲去除這些絮狀沉淀物，可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi),，以400g稍微離心,，上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。我們不建議您以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,，因為它可能會阻塞您的過濾膜,。

解凍牛血清時，請按照所建議的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫),，若血清解凍時改變的溫度太大(如-20℃至37℃),，實驗顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。解凍血清時,，請隨時將之搖晃均勻,，使溫度及成分均一，減少沉淀的發(fā)生。請勿將血清置于37℃太久,。若在37℃放置太久,，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會因此受到損害,，而影響血清的質(zhì)量,。血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要,，可以無須做此步驟,。若必須做血清的熱滅活，請遵守56℃,，30分鐘的原則，并且隨時搖晃均勻,。

牛血清中的“黑膠蟲”

在細(xì)胞培養(yǎng)的時候,，有時會在400倍顯微鏡下看到小黑點在動，小黑點有時呈點狀,，有時呈小的片狀,，運動形式為在原地振動，類似布朗運動,，這種小黑點既不是細(xì)菌,、霉菌，也不是支原體,，目前業(yè)內(nèi)人士稱其為“黑膠蟲”,。

黑膠蟲究竟是一種生物還是非生物，本身就存在爭議,。黑膠蟲一般是存在血清里的,，而血清通常是經(jīng)過0.1μm濾膜過濾的，所以血清里不可能存在細(xì)菌,、霉菌及支原體等微生物,。如果說黑膠蟲不是生物，它會不斷增多,，達(dá)到一定數(shù)量時會與細(xì)胞競爭性生長,，與細(xì)胞競爭培養(yǎng)基中的營養(yǎng)，從而使得細(xì)胞營養(yǎng)不足而死亡,。