ATCC細(xì)胞庫(kù)介紹：

ATCC(美國(guó)模式菌種收集中心)，又稱為美國(guó)菌種保藏中心,， 是位于馬里蘭洲洛克菲勒的一家私營(yíng)的，非贏利性組織,，可提供各種動(dòng)植物細(xì)胞,、標(biāo)準(zhǔn)品、菌株達(dá)兩萬(wàn)多種,。ATCC的創(chuàng)立源于1925年某科學(xué)委員會(huì)意識(shí)到,，科學(xué)研究對(duì)于微生物的需求增大，從而萌發(fā)了一個(gè)想法：創(chuàng)建一個(gè)微生物相關(guān)制品供應(yīng)中心,。至今,，ATCC向世界各地的政府、企業(yè),、科研機(jī)構(gòu)提供生物制品,、技術(shù)支持和培訓(xùn),，成為了一個(gè)以非盈利為目的的全球性質(zhì)的生物資源中心。ATCC擁有目前世界上zui大的,、品種zui豐富的微生物,、細(xì)胞系以及重組DNA原料，同時(shí)它也是科研工作者gogn ren的提供shijieji的可靠的研究材料的供應(yīng)商,。

ATCC細(xì)胞的使用方法：

1、細(xì)胞收到后的操作方法：

　　取25cm²培養(yǎng)瓶,，75%酒精擦拭培養(yǎng)瓶,，放入37℃，5%CO₂細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置4-6小時(shí)或隔夜,，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。然后,，用75%酒精擦拭培養(yǎng)瓶,，拆下封口膜，收集瓶?jī)?nèi)液體于50ml離心管中,，1000rpm離心5min，棄上清,，用6ml細(xì)胞培養(yǎng)基重懸,，全部接種到25cm²培養(yǎng)瓶中，再放入37℃,，5%CO₂細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。如果離心后細(xì)胞量很多，可以直接1:2分瓶培養(yǎng),。

2、細(xì)胞傳代：

細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)瓶的85%及以上面積時(shí),，收集瓶?jī)?nèi)液體于15ml離心管中,，1000rpm離5min，棄上清,，用12ml細(xì)胞培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,，按1:2的比例進(jìn)行接種傳代,，接種到25cm²培養(yǎng)瓶中，放入37℃,，5%CO₂細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),，2-3天更換培養(yǎng)液?！　?/span>

3,、細(xì)胞凍存：

a,、細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)瓶的85%及以上面積時(shí)，收集瓶?jī)?nèi)液體于15ml離心管中,，1000rpm離心5min,，棄上清，用適當(dāng)量的凍存液（基礎(chǔ)培養(yǎng)基：FBS：DMSO=5:4:1）重懸細(xì)胞,，并放置于凍存管中,。

b、先將細(xì)胞凍存管放置于4℃0.5h,，再放置于-20℃1.5h,，然后將其移入-80℃隔夜，24h后可轉(zhuǎn)入液氮中進(jìn)行長(zhǎng)期保存,。

4,、細(xì)胞復(fù)蘇：

a,、從液氮中取出細(xì)胞凍存管，快速將其置入37℃水浴中解凍,，直至凍存管中無(wú)結(jié)晶，然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁,。

b,、將凍存管中的細(xì)胞移至含有5ml細(xì)胞培養(yǎng)液的15ml離心管中，然后1000rpm/min,，離心5min,。

c、棄上清,，沉淀細(xì)胞用6ml細(xì)胞培養(yǎng)基重懸，接種到培養(yǎng)瓶中,，最后放入37℃,，5%CO₂細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

d,、第二天,，換用新鮮細(xì)胞培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。