優(yōu)點(diǎn):與其它方法相比,，有較高的效率和較好的重復(fù)性，它適用于把DNA轉(zhuǎn)染入懸浮或貼壁培養(yǎng)細(xì)胞中,，是目前條件下zui方便的轉(zhuǎn)染方法之一,。二、脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染操作步驟

(1)細(xì)胞培養(yǎng)：取6cm細(xì)胞皿,，向每孔中加入2mL含1~2×105個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)液,，37℃ CO2培養(yǎng)密度至40%~60%，密度過(guò)大,，轉(zhuǎn)染后不利篩選細(xì)胞,。

(2) 轉(zhuǎn)染液制備：在EP管中制備以下兩液(為轉(zhuǎn)染每一個(gè)孔細(xì)胞所用的量)

1. A液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋1ug 質(zhì)粒DNA。

2. B液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋2ul脂質(zhì)體,。

3. 分別將A液與B液輕彈混勻,，靜置5分鐘,。

(3)吸取B液加入至A液中，輕彈混勻,。室溫中置10-15分鐘,。

(4)轉(zhuǎn)染準(zhǔn)備：用1mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次，再加入4mL不含血清培養(yǎng)液,。

(5)轉(zhuǎn)染：把A/B復(fù)合物緩緩加入培養(yǎng)液中,，搖勻，37℃溫箱置6~24小時(shí),，吸除無(wú)血清轉(zhuǎn)染液,，換入正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。

(6)瞬時(shí)轉(zhuǎn)染后,，可在48h-72h細(xì)胞長(zhǎng)滿之后,，提取細(xì)胞蛋白或者RNA，驗(yàn)證敲減/過(guò)表達(dá)效率,。