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液相色譜柱是一種用于液體色譜分析儀器,，其分離其作用是在填料與流動(dòng)相之間進(jìn)行的，柱子的分類是根據(jù)填料類型決定的。
液相色譜柱的維護(hù)步驟：
1. 色譜柱的平衡
反相色譜柱由工廠測(cè)試后是保存在乙腈/水中的。新柱應(yīng)先使用10-20倍柱體積的甲醇或乙腈沖洗色譜柱。請(qǐng)一定確保您分析樣品所使用的流動(dòng)相和乙腈/水互溶。每天用足夠的時(shí)間以流動(dòng)相來平衡色譜柱，這樣色譜柱的壽命也會(huì)變得更長(zhǎng),。
操作步驟：
a. 平衡開始時(shí)將流速緩慢地提高，用流動(dòng)相平衡色譜柱直到獲得穩(wěn)定的基線（緩沖鹽或離子對(duì)試劑流速如果較低,，則需要較長(zhǎng)的時(shí)間來平衡）
b. 如果使用的流動(dòng)相中含有緩沖鹽,，應(yīng)注意用純水"過渡"即每天分析開始前必須先用純水沖洗30分鐘以上再用緩沖鹽流動(dòng)相平衡; 分析結(jié)束后必須先用純水沖洗30分鐘以上除去緩沖鹽之后再用甲醇沖洗30分鐘保護(hù)柱子。
2. 色譜柱的再生
長(zhǎng)期使用的色譜柱,，往往柱效會(huì)下降（柱子的理論塔板數(shù)減低）,。可以對(duì)色譜柱進(jìn)行再生,，在有條件的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)使用一個(gè)廉價(jià)的泵進(jìn)行柱子的再生,。
色譜柱尺寸 柱體積 所用溶劑的體積
125-4mm 1.6ml 30ml
250-4 mm 3.2ml 60ml
250-10mm 20ml 400ml
選擇再生方法：
極性固定相（如Si，NH2* ,，DIOL基色譜填料）的再生：
正庚烷→氯仿→乙酸乙酯→丙酮→乙醇→水**
非極性固定相（如反相色譜填料RP-18,，RP-8，CN等）的再生： 水→乙腈→氯仿（或異丙醇）→乙腈→水
注意：
a. 在對(duì)NH2改性的色譜柱進(jìn)行再生時(shí),，由于NH2可能以銨根離子的形式存在,，因此應(yīng)該在水洗后用0.1M的氨水沖洗，然后再用水沖洗至堿溶液全部流出,。
b. 0.05M稀硫酸可以用來清洗已污染的色譜柱,，如果簡(jiǎn)單的用有機(jī)溶劑/水的處理不能夠洗去硅膠表面吸附的雜質(zhì)，在水洗后加用0.05M稀硫酸沖洗非常有效,。
3. 色譜柱的維護(hù)
a.使用預(yù)柱保護(hù)分析柱（硅膠在極性流動(dòng)相/離子性流動(dòng)相中有一定的溶解度）
b.大多數(shù)反相色譜柱的pH穩(wěn)定范圍是2-7.5,，盡量不超過該色譜柱的pH范圍
c.避免流動(dòng)相組成及極性的劇烈變化
d.流動(dòng)相使用前必須經(jīng)脫氣和過濾處理
e.如果使用極性或離子性的緩沖溶液作流動(dòng)相，應(yīng)在實(shí)驗(yàn)完畢柱子沖洗干凈,，并保存于甲醇或乙腈中
f.氯化物的溶劑對(duì)其有一定的腐蝕性,，故使用時(shí)要注意，柱及連接管內(nèi)不能長(zhǎng)時(shí)間存留此類溶劑,，以避免腐蝕。
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