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反相色譜柱應該如何選擇?

來源:東曹(上海)生物科技有限公司   2023年04月24日 22:07  
液相色譜的柱子通常分為正相柱和反相柱,。正相柱大多以硅膠為柱,,或是在硅膠表面鍵合CN, -NH3 等官能團的鍵合相硅膠柱;反相柱填料主要以硅膠為基質,,在其表面鍵合非極性的十八烷基官能團(ODS) 稱為C18柱,,其它常用的反相柱還有C8, C4, C2和苯基柱等,。另外還有離子交換柱,,GPC柱,,聚合物填料柱等,。
 
反相色譜柱的選擇:
 
1.柱子的PH值使用范圍
 
反相柱優(yōu)點是固定相穩(wěn)定,,應用廣泛,,可使用多種溶劑。但硅膠為基質的填料,,使用時一定要注意流動相的PH范圍,。一般的C18柱PH值范圍都在2-8,流動相的PH值小于2時,,會導致鍵合相的水解,;當PH值大于7時硅膠易溶解;經常使用緩沖液固定相要降解,。一旦發(fā)生上述情況,,色譜柱人口處會塌陷。同樣填料各種不同牌號的色譜柱不盡相同。如果流動相PH較高或經常使用緩沖液時,,建議選擇PH范圍大的柱子,,例如戴安公司的Acclaim柱PH 2-9或Zorbax的PH 2-11. 5的柱子。
 
2.填料的端基封尾(或稱封口)
 
把填料的殘余硅羥基采用封口技術進行端基封尾,,可改善對極性化合物的吸附或拖尾,;含碳量增高了,有利于不易保留化合物的分離,;填料穩(wěn)定性好了,,組分的保留時間重現性就好。如果待分析的樣品屬酸性或堿性的化合物,,最好選用填料經端基封尾的色譜柱,。

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