對(duì)于做重組蛋白原核表達(dá)(大腸桿菌E.coli系統(tǒng))的小伙伴們,破菌是必需的的流程之一,,目前用到的通用方法是用超聲儀進(jìn)行超聲破菌,。但是如果實(shí)驗(yàn)室沒(méi)有超聲儀,或者收集的菌量比較少,,就可以選擇賽爾瑞成的大腸桿菌專用破菌液,。
大腸桿菌專用破菌液
產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)
1. 節(jié)省成本
只需將菌體與破菌液簡(jiǎn)單混勻,然后凍融即可,,不需要超聲儀就能使菌體破碎,,釋放可溶上清。節(jié)省儀器成本和人力成本,。
2. 組成成分溫和
不含還原劑,、強(qiáng)變性劑、離子型去污劑等烈性成分,,對(duì)絕大多數(shù)蛋白結(jié)構(gòu)和活性無(wú)影響。
3. 使用搭配靈活
可搭配賽爾瑞成超級(jí)核酸酶(貨號(hào):CR1001),,降解菌體裂解后的核酸,,以降低破菌液粘度,,以利于后續(xù)操作;也可以根據(jù)需要添加蛋白酶抑制劑,、還原劑,、NaCl等成分。
使用方法
以菌體(g)/化學(xué)破菌液(ml)=1:30(或1:10至1:50之間)比例加入大腸桿菌專用破菌液,,打散混勻,,置于-20°C以下冰箱,待冷凍結(jié)實(shí),。需要破菌時(shí)取出自然解凍,,然后按常規(guī)方法高速冷凍離心,收取破菌上清和菌體沉淀,。
數(shù)據(jù)對(duì)比
注: 1:大腸桿菌專用破菌液破菌上清 2:大腸桿菌專用破菌液破菌沉淀
3:超聲破菌破菌上清 4:超聲破菌破菌沉淀
M:蛋白Marker
搭配賽多培®大腸桿菌高密度表達(dá)培養(yǎng)基,,讓重組蛋白原核表達(dá)更簡(jiǎn)單更方便!
多培®大腸桿菌高密度表達(dá)培養(yǎng)基是賽爾瑞成研發(fā)的一種適合于大腸桿菌生長(zhǎng)和蛋白表達(dá)的即用型全成分培養(yǎng)基,。使用該培養(yǎng)基,,只需一步操作,無(wú)需添加IPTG誘導(dǎo)劑,,即可收獲含表達(dá)蛋白的菌體,,與常規(guī)方法相比,對(duì)絕大多數(shù)蛋白表達(dá),,其菌體生物量和對(duì)應(yīng)的目的蛋白都明顯提高數(shù)倍以上,。
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