索氏提取器中,,經(jīng)典的莫過(guò)于根據(jù)索氏抽提原理、用重量法來(lái)測(cè)定脂肪含量,。
抽提法是測(cè)定粗脂肪含量*普遍的方法,抽提法利用重量法的原理,即先將樣品溶于脂肪溶劑中,,然后利用索氏提取器將脂肪循環(huán)抽提,,*后再測(cè)出抽提前后儀器的重量差,即脂肪的重量,。抽提法需要嚴(yán)格的實(shí)驗(yàn)過(guò)程,,如果過(guò)程沒(méi)有掌握好,很可能嚴(yán)重影響到脂肪的*后含量,。下面,,我們主要來(lái)看看用索氏抽提法測(cè)定脂肪時(shí)應(yīng)該注意的事項(xiàng)。
?。?)樣品應(yīng)干燥后研細(xì),,裝樣品的濾紙筒一定要緊密,不能往外漏樣品,,否則重做,。
(2)放入濾紙筒的高度不能超過(guò)回流彎管,,否則**不易穿透樣品,,脂肪不能全部提出,造成誤差,。
?。?)碰到含多量糖及糊精的樣品,要先以冷水處理,等其干燥后聯(lián)通濾紙一起放入提取器內(nèi),。
?。?)提取時(shí)水浴溫度不能過(guò)高,一般使**剛開(kāi)始沸騰即可(約45℃左右),?;亓魉俣纫悦?-12次/時(shí)為宜。
(5)所用**必須是無(wú)水**,,如含有水分則可能將樣品中的糖以及無(wú)機(jī)物抽出,,造成誤差。
(6)用于樣品測(cè)定脂肪,,可按下式計(jì)算原來(lái)樣品脂肪的含量.
脂肪(﹪)=( W1-W0)/W*(100-A)
脂肪(%)= 物的耐鹽性得到不同程度提高,。其中Zhang和Blumwald(2001)、Zhang等(2001)報(bào)告的轉(zhuǎn)AtNHX1基因番茄可耐200mmol/L的氯化鈉,并把吸收的鈉鹽積累在葉片中,而果實(shí)的品質(zhì)不受影響,。這些研究預(yù)示著在提高植物耐鹽性方面,離子的選擇吸收和跨膜運(yùn)輸?shù)幕蚬こ淌侵参锬望}性種質(zhì)改良的有效途徑,。
A-100克樣品水分的含量(克).
(7)冷凝管上端*好連接一個(gè)氯化鈣干燥管,這樣不僅可以防止空氣中水分進(jìn)入,,而且還可以避免**揮發(fā)在空氣中,,這樣可防止實(shí)驗(yàn)室微小環(huán)境空氣的污染。如無(wú)此裝置,,塞一團(tuán)干脫脂棉球亦可,。
(8)如果沒(méi)有無(wú)水**可以自己制備,制備方法如下:在1000毫升**中,,加入無(wú)水石膏50克,,振搖數(shù)次,靜置1 0小時(shí)以上蒸餾,,收集35℃以下的餾液,,即可應(yīng)用。
(9)將提取瓶放在烘箱內(nèi)干燥時(shí),,瓶口向一側(cè)傾斜45℃放置使揮發(fā)物**易與空氣形成對(duì)流,,這樣干燥迅速。
(10)樣品及醚提出物在烘箱內(nèi)烘干時(shí)間不要過(guò)長(zhǎng),,因?yàn)橐恍┖懿伙柡偷闹舅?,容易在加熱過(guò)程中被氧化成不溶于**的物質(zhì);中等不飽和脂肪酸,,受熱容易被氧化而增加重量.在沒(méi)有真空干燥箱的條件下,,可以在100-105℃干燥1.5-3小時(shí)。
(11)如果沒(méi)有**或無(wú)水**時(shí),,可以用石油醚提取,,石油醚沸點(diǎn)30-60℃為好,。
(12)使用揮發(fā)**或石油醚時(shí),切忌用直接火加熱,。應(yīng)用電熱套電水浴,,電燈泡等.
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