電子顯微鏡和光學(xué)顯微鏡的用途
電子顯微鏡能看到2nm單位以下的細(xì)胞結(jié)構(gòu)。而電子顯微鏡只能看到2nm單位以上的細(xì)胞結(jié)構(gòu),。
電子顯微鏡
以電子束為照明源,,通過電子流對樣品的透射或反射及電磁透鏡的多級(jí)放大后在熒光屏上成像的大型儀器,。
則是利用可見光照明,,將微小物體形成放大影像的光學(xué)儀器,。
概括起來,,電鏡與光鏡主要有以下幾個(gè)方面的區(qū)別:
(1)透鏡不同:電鏡中起放大作用的物鏡是電磁透鏡(能在中央部位產(chǎn)生磁場的環(huán)形電磁線圈),而光鏡的物鏡則是玻璃磨制而成的光學(xué)透鏡,。電鏡中的電磁透鏡共有三組,,分別與光鏡中聚光鏡、物鏡和目鏡的功能相當(dāng),。
(2)照明源不同:電鏡所用的照明源是電子槍發(fā)出的電子流,,而光鏡的照明源是可見光(日光或燈光),由于電子流的波長遠(yuǎn)短于光波波長,,故電鏡的放大及分辨 率顯著地高于光鏡
(3)成像原理不同:在電鏡中,,作用于被檢樣品的電子束經(jīng)電磁透鏡放大后打到熒光屏上成 像或作用于感光膠片成像,。其電子濃淡的差別產(chǎn)生的機(jī)理是,,電子束作用于被檢樣品時(shí),入射電子與物質(zhì)的原子發(fā)生碰撞產(chǎn)生散射,,由于樣品不同部位對電子有不同散射度,,故樣品電子像以濃淡呈現(xiàn)。而光鏡中樣品的物像以亮度差呈現(xiàn),,它是由被檢樣品的不同結(jié)構(gòu)吸收光線多少的不同所造成的,。
(4)分辨率:光學(xué)顯微鏡因?yàn)楣獾母缮媾c衍射作用,分辨率只能局限于02-05um之間,。電子顯微鏡因?yàn)椴捎秒娮邮鳛楣庠?,其分辨率可達(dá)到1-3nm之間,因此光學(xué)顯微鏡的組織觀察屬于微米級(jí)分析,,電子顯微鏡的組織觀測屬于納米級(jí)分析,。
(5)景深:一般光學(xué)顯微鏡的景深在2-3um之間,因此對樣品的表面光滑程度具有*的要求,,所以制樣過程相對比較復(fù)雜,。掃描電鏡的精神則可高達(dá)幾個(gè)毫米,因此對樣品表面的光滑程度幾何沒有任何要求,,樣品制備比較簡單,,有些樣品幾何無需制樣。體式顯微鏡雖然也具有比較大的景深,,但其分辨率卻非常的低,。
放大倍數(shù):光學(xué)顯微鏡有效放大倍數(shù)1000X。電子顯微鏡有效放大倍數(shù),。
(6)所用標(biāo)本制備方式不同:電鏡觀察所用組織細(xì)胞標(biāo)本的制備程序較復(fù)雜,,技術(shù)難度和費(fèi)用都較高,在取材、固定,、脫水和包埋等環(huán)節(jié)上需要特殊的試劑和操作,,zui后還需將包埋好的組織塊放人超薄切片機(jī)切成50~100nm厚的超薄標(biāo)本片。而光鏡觀察的標(biāo)本則一般置于載玻片上,,如普通組織切片標(biāo)本,、細(xì)胞涂片標(biāo)本、組織壓片標(biāo)本和細(xì)胞滴片標(biāo)本,??蛇_(dá)到1000,000X
(7)應(yīng)用領(lǐng)域:光學(xué)顯微鏡主要用于光滑表面的微米級(jí)組織觀察與測量,因?yàn)椴捎每梢姽庾鳛楣庠匆虼瞬粌H能觀察樣品表層組織而且在表層以下的一定范圍內(nèi)的組織同樣也可被觀察到,,并且光學(xué)顯微鏡對于色彩的識(shí)別非常敏感和準(zhǔn)確,。電子顯微鏡主要用于納米級(jí)的樣品表面形貌觀測,因?yàn)閽呙桦婄R是依靠物理信號(hào)的強(qiáng)度來區(qū)分組織信息的,,因此掃描電鏡的圖像都是黑白的,,對于彩色圖像的識(shí)別掃描電鏡顯得無能為力。掃描電鏡不僅可以觀察樣品表面的組織形貌,,通過使用EDS,、WDS、EBSD等不同的附件設(shè)備,,掃描電鏡還可進(jìn)一步擴(kuò)展使用功能,。通過使用EDS、WDS輔助設(shè)備,,掃描電鏡可以對微區(qū)化學(xué)成分進(jìn)行分析,,這一點(diǎn)在失效分析研究領(lǐng)域由為重要。使用EBSD,,掃描電鏡可以對材料的晶格取向進(jìn)行研究,。
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