貼壁生長的細胞,，在培養(yǎng)瓶或者培養(yǎng)皿長至單層鋪滿的狀態(tài)后后,，空間已基本上飽和,，細胞生長,、增殖受阻,，為使其繼續(xù)擴增或生長,，需要進行傳代（再培養(yǎng)）處理。同時,，傳代培養(yǎng)也可用于細胞種的保存,。不僅如此，各種細胞實驗也是以高效的細胞傳代為基礎(chǔ)的,。

懸浮型細胞直接分瓶就可以,，而貼壁細胞則需經(jīng)消化等處理后才能分瓶。一般使用胰蛋白酶,，將貼壁細胞消化成成單個細胞,，也可加入EDTA提高消化能力（EDTA 是一種二價離子的螯合劑，能抑制細胞膜上的Ca2+和Mg2+）,。常用的細胞消化液一般含有0.25%(w/v)的胰酶和0.03% (w/v) EDTA,。

實驗時，先用吸去細胞培養(yǎng)上清,，用PBS清洗細胞,，棄掉洗滌液，重新加入少量的胰酶-EDTA 消化液(根據(jù)培養(yǎng)皿的大小不同,，一般2-5ml消化液即可,，以剛好鋪滿整個皿底為原則)，觀察細胞直到細胞變圓脫離瓶壁,，此過程一般需要3-5分鐘,，為了避免細胞成團，消化細胞的過程中不要拍打細胞瓶,。對于特別難消化的細胞,，可以加入胰酶EDTA 消化液后把細胞置于37°C 促進消化，細胞脫離瓶壁后,，立刻加入含有血清的培養(yǎng)基中止消化,。

800-1000rpm，離心5分鐘,，然后棄去中止用的培養(yǎng)基,，加入適合的新的培養(yǎng)基輕輕混勻細胞，移入到新的培養(yǎng)瓶,。傳代的比例視細胞類型而定,。胰蛋白酶會對某些細胞的細胞膜產(chǎn)生損傷，對于這種類型的細胞，可用細胞刮輕輕刮下細胞,，加入適量的培養(yǎng)基,，輕輕吹打混勻細胞，然后進行傳代培養(yǎng),。

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